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単球分化抗原CD14の機能に関する研究

单核细胞分化抗原CD14的功能研究

基本信息

批准号：
06671070
负责人：
二宮治彦
金额：
$ 0.7万
依托单位：
University of Tsukuba
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06671070/
关键词：
CD14 単球 LPS PNH

项目摘要

1.LPS結合血漿成分の同定健常人血漿中に含まれるLPS-Binding Proteinの同定は、FITC標識LPS(Sigma)と健常人血漿とを混合しこれを液体クロマトグラフィー(ゲル濾過およびイオン交換)によって精製した。分子量約55kDaの蛋白とLPSとの結合が示された。2.LPS複合体の単球への結合能とCD14の役割1.において得たLPS結合能を有する血漿成分の存在下におけるLPSの単球への結合をFITC-LPSを用いてFACScanにより解析した。健常人単球へのLPS/LBPの結合は抗CD14抗体、My4、で単球を前処置することによって阻害された。後天的にGlycosyl Phosphatidylinositol(GPI)結合型膜蛋白が欠損する疾患である発作性夜間血色素尿症(PNH)においてはCD14の欠損した異常単球にはLPSが弱くしか結合しなかった。以上の結果からCD14がLPS receptorとして重要な意義を有することが明らかとなった。3.CD14を介した単球のサイトカイン産生能1.において得られたLBSを用いて、LPS-LBP複合体による単球のサイトカイン産生を測定した。LPSを介した生体反応においては単球の産生するTNF-αが重要ではないかと推定されており、in vitroで単球を分離し、刺激下でのTNF-α産生およびCD14の関与を、抗CD14抗体処理健常人単球、PNH患者単球との間で比較した。健常人単球は抗CD14抗体で処理するとLPS依存性のTNF-α産生が低下した。また、PNH患者単球においては、健常人単球に比してTNF-α産生は低下しており、この低下は異常PNH単球比率に比例していた。以上の結果から1)健常人血漿に含まれるLBPは効率的にLPSに結合し、単球に発現されるCD14のリガンドを形成する、2)CD14は単球に発現するLPS receptorの中でも単球に対する刺激伝達の面から最も重要なリセプターであることが示された。

1. LPS-Binding Protein in Normal Human Plasma (Sigma) and Normal Human Plasma (Sigma) The protein with molecular weight of about 55kDa binds to LPS. 2. The binding energy of LPS complex and CD14 activity 1. The binding energy of LPS complex was determined by FACScan in the presence of plasma components. LPS/LBP binding in healthy individuals is a barrier to anti-CD14 antibody, My4, and anti-CD14 protein binding. Acquired Glycosyl Phosphatidylinositol(GPI)-bound membrane protein is deficient in disease and is associated with progressive nocturnal hemoglobinuria (PNH). The above results are significant for LPS receptor CD14. 3. CD14-induced single cell protein production; 1. LPS-LBP complex production. TNF-α production in LPS mediated biological response was estimated to be important in vitro isolation and stimulation of TNF-α production in CD14 and in comparison with anti-CD14 antibody treatment in healthy individuals and PNH patients. In healthy individuals, LPS-dependent TNF-α production was reduced in response to treatment with anti-CD14 antibodies. TNF-α production is lower in PNH patients than in healthy individuals. These results include: 1) LPS binding and CD14 formation in the plasma of healthy individuals, 2) CD14 formation in the LPS receptor of healthy individuals, 3) CD14 formation in the LPS receptor of healthy individuals, 4) CD14 formation in the LPS receptor of healthy individuals, and 5) CD14 formation in the LPS receptor of healthy individuals.