ラットグリオーマ細胞における神経鞘腫由来成長因子(SDGF)の発現と機能解析

神经鞘瘤衍生生长因子（SDGF）在大鼠胶质瘤细胞中的表达及功能分析

• 批准号: 06671377
• 负责人: 藤巻 高光
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 1995
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06671377/
• 关键词: SDGF; グリオーマ; 増殖因子

【目的】悪性脳腫瘍であるグリオーマにおいてはこれまでに、PDGF,TGF_a,bFGF,IGF-I等の増殖因子の発現が亢進し、また各々のレセプターも発現していることから細胞増殖に深く関与していると考えられている。本研究では、最近、シュワノーマ細胞培養上清より精製され、EGFファミリーに属するシュワノーマ細胞由来増殖因子(SDGF)が、グリオーマ細胞の増殖にどのように関わっているかを明らかにすることを目的とした。ラットグリオーマ細胞である9L,C6,T9等の細胞株では、SDGFが高発現し、またそのレセプターと考えられるEGFレセプターも発現していることより、SDGFはオートクリン増殖因子として機能していることが予想される。このSDGFの発現をアンチセンスRNAで抑さえ、グリオーマ細胞の増殖に与える影響を検討した。【方法】アンチセンスSDGFcDNAをヒトメタロチオネインプロモーターの下流につないだ発現ベクターを構築し、9L細胞に遺伝子導入し、アンチセンスRNA発現株を複数得た。アンチセンスSDGFmRNAの発現はNorthern法により、またSDGFmRNAの発現抑制はSemi-quantitativePCR法にて確認した。得られたクローンを用いて、in vitro(10%血清下),in vivo(ラット皮下腫瘍形成能)での細胞増殖能、腫瘍形成能を親株、或はベクターのみを導入したコントロール細胞と比較検討した。【結果】アンチセンスSDGFmRNAの発現量、内因性SDGFmRNA発現抑制度に相関し、9L細胞の増殖能がin vitroにおいてコントロール細胞と比較し、最大約50%までに、また、in vivoにおいてコントロール細胞移植により形成された腫瘍体積の約20%までに抑制されることがわかった。【結論】以上より、ラットグリオーマ細胞で高い発現が認められるSDGFが、それら腫瘍細胞の増殖、腫瘍形成に関与していることが明かになった。今後、SDGFのhuman counterpartを検索する予定である。

[Purpose] Propagation of epithelial ulcers, PDGF, TGF_a, bFGF, IGF-I, etc. The factors are as follows:ることから Cell proliferation に深く关 and していると卡えられている. This study is based on the recent research on the origin of Semen's cell culture supernatant and EGF Semen's cell culture supernatant. Proliferation factor (SDGF), the growth factor of グリオーマcells, the growth factor of cells, the purpose of growth.ラットグリオーマcell である9L, C6, T9 and other cell lines では, SDGF 高発行し, またそのレセプターと考えられるEGFレセプターも発成していることより、SDGFはオThe function of the ートクリン proliferative factor is the function of the function. The function of SDGF is the suppression of RNA and the proliferation and growth of human cells. [Method] アンチセンスSDGFcDNAをヒトメタロチオネインプロモーターの流につないだ発成ベクターをconstructし, 9L cells were introduced into に缝子, and アンチセンスRNA発成を plural was obtained.アンチセンスSDGFmRNAの発成はNorthern methodにより、またSDGFmRNAの発成はSemi-quantitativePCR methodにてconfirmationした. Get られたクローンを Use いて, in vitro (under 10% serum), in Vivo (subcutaneous tumor-forming ability) cell proliferation ability, tumor-forming ability are the parent strain, or the cells introduced into the cell line of vivo (subcutaneous tumor-forming ability) are compared. [Results] There is a correlation between the amount of SDGFmRNA expression, the inhibitory degree of endogenous SDGFmRNA expression, and the proliferation ability of 9L cells. in vitroにおいてコントロール cell comparisonし、maximum about 50%までに、また、in Vivo cell transplantation can reduce the formation of tumor volume by about 20% and suppress the growth of tumors. [Conclusion] The above-mentioned high-density cells of より and ラットグリオーマ cells are recognized as SDGFが、それらTumor cell proliferation and tumor formation are related to していることが明かになった. From now on, SDGF’s human counterpart will be confirmed.