悪性神経膠腫に対する経口化学療法剤の開発

恶性胶质瘤口服化疗药物的开发

• 批准号: 06671422
• 负责人: 田中 聡
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: Teikyo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06671422/
• 关键词: ベスナリノン; グリオーマ; 分化誘導; アポトーシス; GFAP; Fi-67; Ley

経口強心薬として1990年より市販されているベスナリノンが培養神経膠腫細胞の増殖を抑制し、形態学的および細胞内蛋白の発現において分化誘導およびアポトーシスを誘導する可能性があることをすでに報告している。今回、われわれはヒト脳腫瘍を移植したヌードマウスにベスナリノンを投与することにより、経口投与によるin vivoでの有効性を確認する実験を行った。ヌードマウスの背部皮下にヌードマウス可移植性ヒトグリオーマ株GL-9を移植し、移植後13日目より、ベスナリノン500mg/kgの経口投与を1日1回連日25日間行った。この結果、ベスナリノン経口投与群では、約50%の増殖抑制効果が認められた。移植約5週間後に腫瘍を摘出し、ホルマリン固定の後、腫瘍の免疫組織化学的変化を抗GFAP抗体、抗Ki-67抗体(MIB-1)および抗Le'抗体(BM-1/JIMRO)を用いて検討した。抗GFAP抗体による免疫染色およびHE染色にて組織学的観察を行なったところGFAPの増加と形態学的変化により神経膠腫の分化誘導を示唆する所見が得られた。また、ホルマリン切片に抗原処理を行い、MIB-1抗体による免疫染色により腫瘍の成長解析を行ったところ、ベスナリノンによる増殖抑制が観察された。また、BM-1/JIMROを用いた免疫染色によりアポトーシス関連抗体の発現が増加するとともに、摘出腫瘍を70%エタノールにて固定し、クロロフォルム・フェノール法にてDNAを抽出し、0.8%アガロースゲルにて電気泳動を行うことにより、アポトーシスを示唆するDNAの断片化が観察された。以上の結果より、ベスナリノンはin vivoにおいてもグリオーマの増殖を抑制し、分化を誘導することが示され、臨床応用への可能性が示唆された。

In 1990, the growth inhibition of cultured glioma cells, morphological changes and intracellular protein development were reported. Now, we can confirm the existence of the virus in vivo. Transplantability of GL-9 strain was observed in the subcutaneous tissue of the back of the mouse. The mice were injected orally with 500mg/kg of GL-9 strain 13 days after transplantation and 25 days after transplantation. As a result, approximately 50% of the growth inhibition effect was recognized. About 5 weeks after transplantation, the tumor was extracted, fixed, and studied by immunohistochemical staining with anti-GFAP antibody, anti-Ki-67 antibody (MIB-1), and anti-Le 'antibody (BM-1/JIMRO). Anti-GFAP antibody immunostaining and HE staining were used to detect the growth and differentiation of GFAP. Antigen treatment, MIB-1 antibody treatment, tumor growth analysis, and growth inhibition In addition, BM-1/JIMRO immunostaining was used to detect DNA fragments in 70% of tumors. These results indicate the possibility of in vivo proliferation inhibition, differentiation induction and clinical use.