補体成分C3由来の新しい好中球走化性因子C3βcの慢性炎症における役割

补体成分 C3 衍生的新型中性粒细胞趋化因子 C3βc 在慢性炎症中的作用

• 批准号: 06672174
• 负责人: 中川 秀夫
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Toyama Medical and Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06672174/
• 关键词: 炎症; 滲出液; 補体C3; C3βc; 好中球走化性因子; 血管透過性; アナフィラトキシン

本研究では、以下の点に焦点を絞って研究した。1.滲出液からC3βcの大量精製:新たに発見したC3βcの慢性炎症における役割を解明するために、まずラット・カラゲニン空気嚢炎症モデルの慢性期(day7)の滲出液を数リットル集め、C3βcを大量に精製する方法を検討した。その結果、一回の精製で使用する滲出液は500ml、SP-Sephadexカラムの2回分を合わせてHeparin-Sepharoseカラムにかける等の精製条件を確立した。精製の最終段階である逆相HPLCにおけるC3βcの収率は20〜30μgであった。しかし、逆相HPLCで活性が低下するという問題点を解決できなかった。2.C3βcの細胞浸潤促進作用の検討:C3βcがin vitro Boyden法において好中球に対する走化性活性を示すことを既に明らかにした。次に、in vivo実験系で細胞浸潤促進作用を検討した。ラットの背部皮下に空気嚢を作製し、1%カルボキシメチルセルロース溶液に溶解したC3βc(10^<-6>M)を空気嚢内に注射し、2時間後に嚢内液を抜き取り、細胞数、細胞の種類を測定した。その結果、C3βcは、細胞浸潤を有意に促進し、浸潤した細胞の96%が好中球、単球が4%、リンパ球は殆ど存在しなかった。この結果は、C3βcが主に好中球に対する走化性因子であることを示唆している。3.C3βcの血管透過性亢進作用の検討:精製したC3βc(8x10^<-6>M)を予め色素(Evans Blue)を静注したラットに皮内注射し、その30分後に注射部位の皮膚の一定面積を切取り、色素を抽出、定量した。その結果、C3βcはC3aと同程度の強い血管透過性亢進作用を示した。このC3βcによる血管透過性亢進作用は、cyproheptadineによって強く抑制された。これらの結果から、C3βcはC3aと同程度のアナフィラトキシンとして、慢性炎症の血管透過性亢進に関与していることが推測される。

In this study, the following points focus on the study. 1. The number of exudates (C3 β c), C3 β c, chronic inflammation, chronic inflammation, chronic inflammation. The results show that the precision conditions such as 500ml, SP-Sephadex, and so on, are confirmed in one cycle. The rate of C3 β cysteine is 20 ~ 30 μ g in the range of 20 ~ 30 μ g. The precision is the highest in the range of 20 ~ 30 μ g of HPLC. The activity of HPLC in reverse phase is lower than that of normal phase. The promoting effect of cell immersion in 2.C3 β c: C 3 β cysteine in vitro Boyden method showed that the ball was good, the waning activity showed that it was clear that there was no significant difference. The promoting effect of cell immersion in secondary and in vivo cells was not significant. The back of the body was filled with an empty tube, 1% of the solution was dissolved, and the C3 β c (10 ^ & lt;-6>M) was injected into the room. After 2 hours, the temperature was measured, such as the number of cells, the number of cells and so on. The results showed that C3 β c, cytopathic acid intentionally promoted, immersed in 96% of the cells, the ball was good at 96%, the ball was 4%, and the ball was exhausted. The results showed that C _ 3 β _ c was good for the ball, and the walking factor was significantly increased. The effect of 3.C3 β c on vascular permeability: Evans Blue was injected intravenously with C3 β c (8x10 ^ & lt;-6>M). After 30 minutes, the skin of the injection site was excised, extracted and quantified. The results showed that C3 β C3a enhanced the effect of vascular permeability in the same degree. The hyperpermeability of blood vessels was enhanced by C3 β cysteine, and the vascular permeability was strongly inhibited by cyproheptadine. The results showed that the levels of C3 β-c3a, C3a, chronic inflammation, hypervascular permeability and chronic inflammation were significantly higher than those of normal controls.