歯肉溝滲出液中エクソソームを用いたリキッドバイオプシーの可能性

使用龈沟液中的外泌体进行液体活检的可能性

• 批准号: 20K10083
• 负责人: 川本 章代
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Osaka Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K10083/
• 关键词: エクソソーム; 歯肉溝滲出液; miRNA

糖尿病罹患患者における歯周病の増悪、ならびに歯周病罹患患者における糖尿病の増悪など、両疾患は相互に関係することが知られているところである。また、種々のがん患者や、アルツハイマー型認知症患者などと健常者の血清や脳脊髄液miRNAの発現パターンを比較し特有のmiRNAを同定した報告がある背景より、歯科領域において採取できる唾液や歯肉溝滲出液からもmiRNA採取が可能であれば、リキッドバイオプシーが可能ではないかと考え、今回は糖尿病関連歯周病特有のmiRNA発現パターンを探索することを目的として、歯肉溝滲出液からエクソソームを抽出し、エクソソーム中miRNAを探索することとした。歯肉溝滲出液からのエクソソームの採取を確実なものとするために、事前にＥＬＳＡー２０００ＺＳを用いて粒子径測定を実施した。１～１０マイクロメートルの粒子径の波形も検出されたため、０．２２マイクロメートルポアサイズのフィルターを事前に使用し不要なものを取り除いた。エクソソームの粒子径は３０～１５０ｎｍと言われており、エクソソームの検出を示す１００ｎｍ前後にピーク波形を確認し、確実に検出できることを確認した。糖尿病罹患患者と非糖尿病罹患患者からの歯肉溝滲出液の採取に先立ち、６点法による歯周精密検査を実施した。歯周病の程度や有無は、歯周治療のガイドライン２０２２（特定非営利活動法人日本歯周病学会編）を参考にした。出血部位からの採取はできないため、検査とは別日にPeriopaperを歯肉溝に挿入し歯肉溝滲出液を採取した。同日に十分量が採取できない場合は、２回にわけて採取した。ペリオペーパーにて採取後、冷凍（－８０度）で保存した。全ての試料が揃った時点で３D-geneマイクロRNAチップによる網羅的解析を実施した。現在、結果の解析中である。

Patients with diabetes suffer from に お け る 歯 weeks disease の raised 悪, な ら び に 歯 weeks disease cancer patients に お け る diabetes の raised 悪 な ど, struck disorders は に masato is す る こ と が know ら れ て い る と こ ろ で あ る. ま た, kind of 々 の が ん や, ア ル ツ ハ イ マ sufferer ー cognitive な ど と health often is の serum や 脳 spinal marrow fluid micrornas の 発 now パ タ ー ン を compare し の unique miRNA を with fixed し た report が あ る background よ り, 歯 field に お い て take で き る saliva や 歯 meat ditch exudate か ら も micrornas may take が で あ れ ば, リ キ ッ ド バ イ オ プ シ ー が may で は な い か と え test week, today back to は diabetes masato even 歯 disease endemic の micrornas 発 now パ タ ー ン を explore す る こ と を purpose と し て, 歯 meat ditch exudate か ら エ ク ソ ソ ー ム を spare し, エ ク ソ ソ ー ム micrornas in を explore す る こ と と し た. 歯 meat ditch exudate か ら の エ ク ソ ソ ー ム の take を indeed be な も の と す る た め に に, advance ELSA ー 2000 zs を using い て particle diameter measurement を be applied し た. 1 ~ 10 マ イ ク ロ メ ー ト ル の particle diameter の waveform も 検 out さ れ た た め, 0.22 マ イ ク ロ メ ー ト ル ポ ア サ イ ズ の フ ィ ル タ ー に を advance using し don't な も の を take り except い た. エ ク ソ ソ ー ム の particle diameter は 30 ~ 150 nm と said わ れ て お り, エ ク ソ ソ ー ム の 検 out を す indicated before and after the 100 - nm に ピ ー ク waveform を confirm し, really be に 検 out で き る こ と を confirm し た. Patients with diabetes suffer from と cancer patients without diabetes か ら の 歯 meat ditch exudate の に in a first state ち, 6 points に よ る 歯 weeks precision 検 check を be applied し た. 歯 weeks degree of disease の や は, 歯 weeks treatment の ガ イ ド ラ イ ン 2022 (specific 営 disease society activities, corporate Japan 歯 weeks) を reference に し た. Bleeding か ら の take は で き な い た め, 検 と は don't day に Periopaper を 歯 meat ditch に scions into し 歯 meat ditch exudate を take し た. On the same day, the に ten-component が is carried out through で な な, the が occasion is carried out through た, and the two-time にわけて is carried out through た. Youdaoplaceholder0, ペ, パ, にて にて after collection, freeze (-80 degrees) で store, た た. Analysis of the complete て batch sample が揃った time point で3D-gene を <s:1> ロRNAチップによる net を application た. Now, the result is in the である parsing.

项目成果

Detection of exosomal miRNA in GCF with chronic periodontitis

慢性牙周炎GCF中外泌体miRNA的检测

• DOI: 10.18905/jodu.55.1_73
• 发表时间: 2021
• 期刊: Journal of Osaka Dental University
• 作者: R. Kato;A. Kawamoto;Y. Hashimoto;M. Hashimoto;K. Takahashi
• 通讯作者: K. Takahashi

血圧脈波検査を用いた血管老化評価の有用性の探索

探索使用血压脉搏波测试评估血管老化的有用性

• 发表时间: 2022
• 作者: 三好伸典,川本章代,田中球生,矢田仁美,山本千種,髙橋一也

動脈硬化に関する唾液中バイオマーカーの探索

寻找与动脉硬化相关的唾液生物标志物

• 发表时间: 2022
• 作者: 三好伸典;川本章代;濱田吉宏;本田義知;二宮雄一 ;志水秀郎;髙橋一也
• 通讯作者: 髙橋一也

加齢と歯の喪失が顎堤粘膜の感覚機能に及ぼす影響

衰老和牙齿缺失对牙槽嵴粘膜感觉功能的影响

• 发表时间: 2021
• 作者: Yoshikawa E;Suzuki A;Iinuma M;Azuma K;Kubo KY;張 蕾，島田明子，楠 尊行，井上太郎，川本章代，髙橋一也
• 通讯作者: 張 蕾，島田明子，楠 尊行，井上太郎，川本章代，髙橋一也

Effect of aging and tooth loss on sensory function of alveolar mucosa

衰老和牙齿缺失对牙槽粘膜感觉功能的影响

• DOI: 10.1111/joor.13310
• 发表时间: 2022
• 期刊: J Oral Rehabil
• 影响因子: 2.9
• 作者: Zhang L;Shimada A;Kusunoki T;Inoue T;Kawamoto A;Takahashi K.
• 通讯作者: Takahashi K.