肝ならびに小腸上皮細胞におけるリポタンパク質合成・分泌の制御機構
肝及小肠上皮细胞脂蛋白合成与分泌的控制机制
基本信息
- 批准号:06672200
- 负责人:
- 金额:$ 1.28万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
- 财政年份:1994
- 资助国家:日本
- 起止时间:1994 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
リポタンパク質の合成・分泌の調節機構、特にプレーゴルジ領域(小胞体)でのアポリポタンパク質の分解機構を明らかにするため、ヒト肝癌細胞HepG2及びヒト小腸上皮モデル細胞Caco2を用い、生合成されたapoB、apoA-1、apo(a)等の細胞内分解過程を解析した。その結果、以下に示す新しい知見を得た。1.HepG2をbrefeldin A存在下[^<35>S]Metでパルス-チェイスし、生合成されたapoBの小胞体内での分解過程を検討した。オレイン酸添加により細胞内トリグリセリド量を増加さすと、apoB分解が抑制されることが明らかになった。すなわち小胞体内での脂質とapoBのアセンブルがapoB分解を調節していることが示唆された。2.HepG2を[^<35>S]Metでラベル後、シギトニン処理したセミインタクトな細胞系でapoB分解が再現できた。また細胞分画により[^<35>S]apoBを含む小胞体を単離することが可能になった。両系においてALLNやALLMなどのチオールプロテアーゼ阻害薬がapoB分解を強く抑制することが明らかになった。3.Caco2をパルス-チェイスした結果、本細胞にもHepG2同様、小胞体内にapoB分解系が存在することが明らかになった。一方Caco2はHepG2と異なりapoA-1も一部分解することが明らかとなり、分解系に相違があることが示唆された。4.HepG2及びCaco2ともapo(a)を生合成していないことが明らかになった。よってapo(a)合成・分泌の調節機構解析のため、apo(a)cDNAのtransfectionを計画している。以上、リポタンパク質合成・分泌の調節に係わる小胞体内アポリポタンパク質分解機構の一端が明らかにされた。今後、さらに詳細な解析を進めたい。
To analyze the regulation mechanism of synthesis and secretion of protein, the mechanism of decomposition of protein, especially in the domain of small cell, the intracellular decomposition process of apoB, apoA-1, apo(a), etc. in HepG2 and Caco2 cells. The results are shown below. 1. To investigate the decomposition of Met in the presence of HepG2 brefeldin A<35>. The increase in the amount of apoB and the increase in the amount of apoB and apoB in the presence of acid The lipid profile of apoB in the cytoplasm is regulated by apoB decomposition. 2. HepG2-<35>Met cell line apoB decomposition and reproduction after treatment with HepG2-Met. The <35>cells were separated and the apoB was isolated. ALLN and ALLM are the most important components of APB decomposition. 3. Caco2 is the same as HepG2 in this cell, and apoB decomposition system exists in this cell. A party Caco2 is different from apoA-1, and the solution is clear and the decomposition system is contrary. 4. It is clear that HepG2 and Caco2 will be combined into a product. Analysis of regulatory mechanisms for apo(a) synthesis and secretion, and planning of apo(a)cDNA transfection. The regulation of protein synthesis and secretion is one of the most important aspects of protein decomposition mechanism in small cells. In the future, the detailed analysis will be carried out.
项目成果
期刊论文数量(8)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Mineo,C.: "Angiotensin III binding activity in cultured porcine arterial endothelial cells" Biochem.Pharmacol.48. 1993-1995 (1994)
Mineo,C.:“培养的猪动脉内皮细胞中血管紧张素 III 的结合活性”Biochem.Pharmacol.48。
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- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
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Hiroyuki Itabe:“识别泡沫细胞的抗氧化剂 LDL 单克隆抗体”动脉硬化。 22. 275-280 (1994)
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
今中 常雄: "動脈硬化巣認識モノクローナル抗体を用いた動脈壁脂質蓄積機構の解析" 動脈硬化. 21. 633-637 (1994)
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- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Itabe,H.: "A monoclonal antibody asainst oxidiged lipoprotein recognizes foam cells in atherosclerotic lesions" J.Biol.Chem.269. 15274-15279 (1994)
Itabe,H.:“抗氧化脂蛋白的单克隆抗体可识别动脉粥样硬化病变中的泡沫细胞”J.Biol.Chem.269。
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- 发表时间:
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