酵母におけるPAFの生理機能の探索-細胞増殖との関連より-

探究PAF在酵母中的生理功能——从与细胞增殖的关系出发——

• 批准号: 06806012
• 负责人: 中山 玲子
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Kyoto Women's University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06806012/
• 关键词: Saccharomyces cerevisiae; Yeast; Platelet-activating factor(PAF); Cell growth; Cell cycle; cAMP(サイクリックAMP)

血小板活性化因子(PAF)は、多彩な生理作用を有するリン脂質である。本研究では出芽酵母S.cerevisiaeにおけるPAFの生理作用を探索する目的で、細胞増殖との関連に焦点を絞り、以下の実験を行った。1.細胞周期とPAFの産生(1)細胞レベルによるPAF産生:同調培養した各細胞周期の酵母細胞をカルシウムイオノフォアA23187で刺激した結果、一倍体及び二倍体細胞ともにG1>M>S期の順にPAF産生量が高いことが判明した。(2)PAF代謝関連酵素活性:ミクロソーム画分のPAF合成酵素、アセチルトランスフェラーゼ活性は、G1,M期に高かった。また、細胞質画分の分解酵素PAFアセチルヒドロラーゼ活性はS期に高かった。以上の結果は、(1)の細胞レベルでのPAF産生能と高い相関性を示した。2.PAFによる増殖調節機構の解明(1)PAFの細胞増殖への影響:PAF(10^<-6>M)を培養液に添加すると酵母の細胞増殖は阻害された。また、構造類縁体やPAFレセプターアンタゴニストを用いて検討した結果、PAFによる細胞増殖の阻害はPAF分子に特異的な生理作用であることが示唆された。(2)細胞内cAMPレベルへの影響:PAF濃度依存的(10^<-11>M〜)に細胞内のcAMP濃度が低下し、このPAFの作用は、アンタゴニストにより抑制された。(3)アデニル酸シクラーゼ活性への影響:PAF(10^<-6>M)で処理した酵母の細胞膜アデニル酸シクラーゼ活性を測定した結果、未処理のものの約10%に低下していた。また、PAF濃度依存的に本酵素活性が阻害されることも判明した。3.結論 以上の結果より、PAFは出芽酵母の細胞増殖、特にG1期制御に関与していることが示唆され、更にその機能について検討中である。

Platelet activating factor (PAF) has a physiological effect and is a polypeptide. The purpose of this study was to explore the physiological role of PAF in the budding yeast S. cerevisiae, to focus on cell proliferation, and to conduct the following activities. 1. Cell cycle and PAF production (1) Cell PAF production: Synchronized culture of each cell cycle of yeast cells As a result of the stimulation of ォA23187, it was found that the production amount of PAF in haploid and diploid cells in the G1>M>S phase was high. (2) Enzyme activity related to PAF metabolism: PAF synthesis enzyme, PAF synthesis enzyme, G1, M phase high enzyme activity.また、The cytoplasmic decomposition enzyme PAF アセチルヒドロラーゼactivity is high in the S phase. The above results show that (1) there is a high correlation between the PAF production capacity of the cells. 2. Explanation of PAF's proliferation regulatory mechanism (1) The influence of PAF on cell proliferation: Adding PAF (10^<-6>M) to the culture medium can hinder cell proliferation when yeast is added.また, structure-like body やPAF レセプターアンタゴニストを use いて検した results, PA F is an inhibitor of cell proliferation and a specific physiological action of the PAF molecule. (2) Influence of intracellular cAMP: PAF concentration-dependent (10^<-11>M~), intracellular cAMP concentration is reduced, and the effect of PAF is suppressed. (3) The influence of the active activity of アデニル acid シクラーゼ: PAF (10^<-6>M) and the yeast treatment The results of the measurement of the cell membrane agaric acid activity were found to be approximately 10% lower in untreated cells. It has been found that the activity of this enzyme is inhibited depending on the concentration of PAF. 3.Conclusion The above results indicate that PAF and budding yeast cells are proliferating, and the specific G1 phase control is controlled and controlled, and the function of PAF is improved.

项目成果

中山 玲子: "出芽酵母の細胞増殖とPAFの産生" 生化学. 66. 699- (1994)

Reiko Nakayama：“酿酒酵母中的细胞增殖和 PAF 生产”生物化学 66. 699- (1994)。

中山 玲子: "出芽酵母の細胞増殖とPAF" 日本農芸化学会誌. 68. 601- (1994)

Reiko Nakayama：“酿酒酵母的细胞增殖和 PAF”日本农业化学学会杂志 68. 601-（1994）。

Reiko Nakayama: "Saccharomyces cerevisiae cells produce platelet-activating factor in response to calcium ionophore A23187" Biosci.Biotech.Biochem.58. 1115-1119 (1994)

Reiko Nakayama：“酿酒酵母细胞响应钙离子载体 A23187 产生血小板激活因子”Biosci.Biotech.Biochem.58。

中山 玲子: "出芽酵母の細胞増殖に及ぼすPAFの影響" 日本農芸化学会誌. 68. 1409-1410 (1994)

Reiko Nakayama：“PAF 对酿酒酵母细胞增殖的影响”日本农业化学学会杂志 68. 1409-1410 (1994)。