Wilms腫瘍癌抑制遺伝子WT1の機能解析

Wilms抑癌基因WT1的功能分析

• 批准号: 07671954
• 负责人: 福重 隆彦
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Kagoshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07671954/
• 关键词: Wilms腫瘍; 癌抑制遺伝子(WT1); 増殖因子; ミッドカイン(MK); CATアッセイ; ポリオーマ大型T抗原

Wilms腫瘍癌抑制遺伝子(WT1)の機能解明のため以下の3つの研究を行った。研究1)ヘパリン結合性増殖因子ミッドカイン(MK)の発現調節領域(プロモーター)とCAT遺伝子を融合させたレポータープラスミドと、WT1タンパクを発現するエフェクタープラスミドを、同時に種々の培養細胞に導入し、CATの活性を測定(CATアッセイ)することでWT1タンパクのMK発現に対する効果を観察した。結果(A)WT1タンパクはMKプロモーター活性を抑制した。(平成7年日本小児外科学会総会発表)(B)MKプロモーター領域の2ヶ所のWT1結合部位を欠損させると、抑制効果は消失した。研究2)研究1)と同様な方法でDNA型腫瘍ウイルスポリオーマの大型T抗原がMKプロモーター活性を上昇させることを証明した。大型T抗原とWT1タンパクが複合体を形成するかどうか免疫沈降法を用いて検討しているが、現在のところ複合体形成を積極的に指示するデーターは得られていない。研究3)WT1強制発現Wilms腫瘍細胞株G401の解析結果。遺伝子導入に用いたWT1スプライシングバリアント(KTS+と-)で強制発現株は異った性格を示した。以下にまとめを示す。(平成7年日本癌学会発表)G401-WT1-KTS(-) G401-WT1-KTS(+)細胞増殖能 低下 不変血清依存性 増加 軽度増加付着依存性 不変 増加MK発現 不変 低下ヌードマウスでの腫瘍原性 有りだが腫瘍は大きくならない 消失今後の展開)現在まで、7例のWilms患者の尿を検討したところ6例でMKの発現がみられた。MKがWilms腫瘍の腫瘍マーカーとなる可能性を今後検討していく予定である。

The <s:1> function of Wilms' abscess cancer suppressor 伝 sub (WT1) is explained ため. The following is the study of を rows った. Study 1) ヘ パ リ ン associativity raised colonization factor ミ ッ ド カ イ ン (MK) の 発 now adjust field (プ ロ モ ー タ ー) と CAT son survived 伝 を fusion さ せ た レ ポ ー タ ー プ ラ ス ミ ド と, WT1 タ ン パ ク を 発 now す る エ フ ェ ク タ ー プ ラ ス ミ ド を, at the same time に 々 の culture cell に import し, CAT activity の を determination (CAT ア ッ セ イ) す る こ と で WT1 タ ン パ ク の MK 発 now に す seaborne る unseen fruit を 観 examine し た. Result (A) : The activity of WT1タ <e:1> パ <s:1> た MKプロモ タ タ を was を inhibited by た た. (small pp.47-53 seven years in Japan where surgeons 総 発 table) (B) MK プ ロ モ ー タ の ー field 2 ヶ の WT1 combining site を owe loss さ せ る と disappear, inhibition of unseen fruit は し た. With others in study 2) 1) と な method で DNA type swollen sores ウ イ ル ス ポ リ オ ー マ の large T antigen が MK プ ロ モ ー タ ー active を rise さ せ る こ と を prove し た. Large T antigen と WT1 タ ン パ ク が complex を form す る か ど う か を immune sink method with い て beg し 検 て い る が, now の と こ ろ complex formation を positive に instructions す る デ ー タ ー は have ら れ て い な い. Study 3) Analysis results of Wilms abscess cell line G401 <s:1> with forced occurrence of WT1. Heritage 伝 son import に with い た WT1 ス プ ラ イ シ ン グ バ リ ア ン ト (KTS + と -) で forced 発 different showing strains は っ た を personality shown し た. The following にまとめを shows す. (Published by the Japanese Cancer Society in Heisei 7)G401-WT1-KTS(-) G401-WT1-KTS(+) low immutability, immutability, increased 軽 degree, immutability of immutability, MK with immutability, low ヌ <s:1> ド <s:1> ウスで <s:1> abscess, large <s:1> くならな くならな だが Now まで, in 7 cases of <s:1> Wilms patients, the <s:1> urine を検 attacks <s:1> たと ろ ろ and in 6 cases でMK がみられた occur がみられた. MKがWilms abscess <s:1> abscess カ カ となる となる possibility を future 検 discuss <s:1> て く く く determine である.