Prevotella intermediaの赤血球凝集因子の精製と局在性について

中间普雷沃菌血凝因子的纯化和定位

• 批准号: 07672002
• 负责人: 福島 久典
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Osaka Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07672002/
• 关键词: Prevotella intermedia; hemagglutinin; Fimbriae

1.線毛をもたないP. intermedia strain E18からmechanical shearing, Ammonium sulfate precipitation, sucrose gradient ultracentrifugation, Arginine sepharoseおよびGel filtrationでE18 hemagglutininを精製した。SDS-PAGEでは25kDa付近に1本のbandが得られた。ついでE18 hemagglutininを抗原として家兎にFreund's incomplete adjuvantとともに接種し、充分抗体価を上昇させたのち、Protein A Sepharoseを用いてIgGを部分精製した。このIgGを用いてWestern blottingを行うと25kDa付近に発色がみられた。それゆえ25kDa付近のタンパクがE18 hemagglutininであると考えられる。さらに、このIgGを用いて免疫電顕で観察すると、gold粒子はP. intermedia strain E18菌体表層に点在しているのが認められた。一方、対照として用いた赤血球凝集性のないP. intermediaの菌体表層にはgold粒子は認められなかった。この結果はE18 hemagglutininがP. intermedia strain E18の菌体表層に局在することを示している。2.Type c線毛をもつP. intermedia strain 17から類似の方法で線毛性17 hemagglutininを精製した。また部分精製したIgGを用いて免疫電顕で観察した結果、E18 hemagglutininがP. intermedia strain E18の菌体表層に局在することを示した(Oral Microbiol Immunol 11:42-50,1996)。以上FimbrialおよびNon-fimbrial hemagglutininをP. intermediaから分離精製できたと考えられるので次のstepとしてアミノ酸のN末端やDNA sequenceについて検討中である。

1. Thread hair を たな たな たな P. intermedia strain 18 ら らmechanical shearing, Ammonium sulfate precipitation sucrose gradient ultracentrifugation, Arginine sepharoseおよびGel filtrationでE18 hemagglutininを refining た. SDS-PAGEで に 25kDa pay nearly に1 copy of <s:1> bandが られた. つ い で E18 hemagglutinin antigen of を と し て home 兎 に Freund 's incomplete adjuvant と と も に vaccination し, sufficient antibody 価 を rise さ せ た の ち, Protein A Sepharose を with い て IgG を part refined し た. <s:1> <s:1> IgGを was used by を てWestern blottingを to うと25kDa for nearly に development がみられた. Youdaoplaceholder0 25kDa fu jinyou タ パ パ が がE18 hemagglutininであると kao えられる. さ ら に, こ を の IgG with い て immune electric 顕 で す was 観 る と, gold particle は p. intermedia strain at E18 bacteria surface に し て い る の が recognize め ら れ た. Side, polices according to と し て in い た red blood cell agglutinative の な い p. intermedia の bacteria surface に は gold particles は recognize め ら れ な か っ た. <s:1> the results of <s:1> E18 hemagglutininがP. intermedia strain E18 <s:1> the surface layer に of the bacteria was found in する とを とを, which indicated <s:1> て る る る. 2.Type c line wool を を を P. intermedia strain 17 ら ら similar to <s:1> method で line wool 17 hemagglutininを refining <s:1> た. を use い ま た part refined し た IgG て immune electric 顕 で 観 examine し た results, E18 hemagglutinin が p. intermedia strain E18 の bacteria surface に bureau in す る こ と を shown し た (Oral Microbiol Immunol 11:42-50,1996. Above Fimbrial お よ び Non - Fimbrial hemagglutinin を p. intermedia か ら separation of refined で き た と exam え ら れ る の の で time step と し て ア ミ ノ acid の N terminal や DNA sequence に つ い て 検 beg in で あ る.

项目成果

金下桂三、福島久典: "線毛をもたないPrevotella intermediaから分離した赤血球凝集因子の精製" 歯科医学. 58. 133-143 (1995)

Keizo Kanashita，Hisanori Fukushima：“从没有菌毛的中间普雷沃菌中分离出的血凝因子的纯化”牙科 58. 133-143 (1995)。

土居正英、福島久典: "黒色色素非産生性Prevotella intermediaの性状について" 歯科医学. 58. 189-204 (1995)

Masahide Doi，Hisanori Fukushima：“产生非黑色素的中间普雷沃氏菌的特征”牙科 58. 189-204 (1995)。

林美行、福島久典: "線毛をもたないPrevotella intermediaから分離精製した赤血球凝集因子の性状について" 歯科医学. 58. 205-216 (1995)

Yoshiyuki Hayashi、Hisanori Fukushima：“从没有菌毛的中间普雷沃氏菌中分离和纯化的血凝因子的特性”牙科 58. 205-216 (1995)。

Leung K-P, Fukushima et al.: "Prevotella intermedia fimbriac mediate hemagglutination" Oral Microbiol Immunol. 11. 42-50 (1996)

Leung K-P、Fukushima 等人：“中间普雷沃菌毛毛介导血凝”口腔微生物免疫学。