Long-PCRによる日本人α-サラセミア遺伝子異常の研究

使用长PCR研究日本α-地中海贫血基因异常

• 批准号: 07672489
• 负责人: 山本 邦光
• 金额: --
• 依托单位: Yamaguchi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07672489/
• 关键词: αグロビン; PCR; 点変異; 挿入; 欠失; 異常血色素; サラセミア; SEA

αグロビン遺伝子は,第16番染色体上に,上流よりα_2,α_1と2個の遺伝子が従列に位置する.更に,α_2の約3.5kb上流よりα_1の3'末端にかけてX,Y,Zの3種類の相同性が高い領域が,重複して2組存在しており,α_2及びα_1遺伝子は何れも,それぞれのZ領域に位置している.このことを踏まえて下記の4項目の検討を計画し,long-PCRの技術を駆使して順次検討を加えている.1.α_1,α_2グロビン領域(各々約2kb)のPCRプロダクトの合成法の確立について(1)α_2グロビン遺伝子を含む約890bpのPCRは既に確立している.(2)α_1グロビン遺伝子を含む約840bpのPCRは(1)ほど容易ではなく,現在検討中である.(3)α_1グロビン遺伝子が存在するZ領域約2kbのPCRは,現在検討中であるが,極めて困難である.引き続き検討する.(4)α_2グロビン遺伝子が存在するZ領域約2kb及びα_1,α_2を含む約5kbのPCRは今後検討する.2.点変異あるいは数塩基の挿入又は欠失による異常血色素のDNAシーケンサーによるDNA分析法の確立についてα_2グロビン遺伝子において既に確立している.他の領域についてもPCR法が確立されれば解決する.3.広範囲欠失型のサラセミアの分析法の確立について広範囲の欠失型の1つで、SEA型のPCR法およびDNAシーケンサーによる分析法は確立している.他の広範囲欠失型のサラセミアの分析法は今後の課題であるので引き続き検討する.4.mRNAを鋳型とするRT-PCRとのコンビネーションによる異常血色素を含むαサラセミアの出現機序の探査についていまだ,検討の段階に入っておらず今後重点的に検討する.以上,研究実績の概要を記したが,総括すると以下のようになる.この研究はPCR法の確立が鍵となる.しかし,αグロビン遺伝子のPCR法は他の遺伝子領域に比して困難なので,今後更に種々検討をしなければならない.一方,4.については比較的容易に検討できると考えられるので,この方面の検討にも注力したい.

The alpha gene is located on chromosome 16, upstream of α_2,α_1 and 2 genes. Furthermore, there are two groups of α_2 and α_1 genes in the 3'-terminal region of α_1, which are identical to X,Y and Z genes in the middle region of α_2 and α_1. 1. Establishment of PCR primers in α_1,α_2 promoter regions (about 2kb each). 2. Establishment of PCR primers in α_2 promoter regions (about 890bp each). (2)α_1 DNA sequence contains about 840bp of PCR. (3)α_1 DNA fragment exists in the Z domain about 2kb in PCR. I'm sorry. (4)The presence of α_2 protein in the Z-domain is about 2 kb and the presence of α_1,α_2 protein in the Z-domain is about 5kb. 2. The presence of α_2 protein in the Z-domain is about 5 kb. The PCR method for other domains is established and solved. 3. The analytical method for the determination of the missing type of DNA is established. 4. mRNA typing, RT-PCR and PCR analysis of abnormal hemoglobin, including the detection of the occurrence mechanism of alpha deletion, and the analysis of the stages of detection. The above summary of research results is summarized below. The key to the establishment of PCR method in this study. The PCR method of alpha-fragment gene is more difficult to detect in other gene fields, and it will be more difficult in the future. On the one hand, 4. It is easy to compare the two aspects of the study.