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セレン輸送タンパク質のapoER2受容体を介する２型糖尿病悪化メカニズムの解明

阐明硒转运蛋白apoER2受体介导的2型糖尿病加重机制

基本信息

批准号：
15H06743
负责人：
黒川優
金额：
$ 0.92万
依托单位：
Osaka Ohtani University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
财政年份：
2015
资助国家：
日本
起止时间：
2015-08-28 至 2016-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は、哺乳類の組織に、選択的に必須微量元素であるセレンを分配するタンパク質である、セレンタンパク質Pの生理的な機能を解析することを目的としている。セレンの代謝異常が２型糖尿病を悪化させることが近年報告されてきている。肝臓で合成され、精巣、腎臓、脳、筋肉へセレンを輸送するセレンタンパク質Pが糖尿病を悪化させるメカニズムを分子レベルで解析する。セレンを含有するアミノ酸のセレンタンパク質Pへの取り込みは厳密に制御されているため、一般的なタンパク質の過剰発現を利用した方法では大量に生成することが困難である。そこで今年度は、セレンタンパク質Pを発現させるベクターの部位特異的変異の導入と組換えを行い、生成するタンパク質の構造の最適化と発現量の向上に成功した。さらにこれらのタンパク質をマウスの培養細胞で発現させ、in vitro で機能を維持したまま細胞外に分泌されることを確認した。また研究の目的とする遺伝子の発現を抑制するためにRNA干渉法を利用した。この実験のためにレンチウイルスを作製、細胞に感染させ、９割の遺伝子発現を抑制することに成功した。セレンタンパク質Pが細胞に取り込まれる場合の指標を簡便に解析することを目的とし、培養細胞中の複数のセレンタンパク質のうち、セレンの濃度に依存する遺伝子をリアルタイムPCRで解析した。その結果、特定の遺伝子群の発現量がセレンの濃度に依存することを明らかにし、放射性同位体を使用することなく、セレンタンパク質Pの取り込み効率を測定することが可能になった。

In this study, the organization of mammals, the selected microelements must be used in the study, the organization of mammals, the selected microelements, the distribution of trace elements, the distribution of microelements, and the ability to analyze the physiological characteristics of human physiology. In recent years, it has been reported in recent years that type 2 diabetes is not common. The liver is used to synthesize, extract, treat, muscle, muscle and muscle. There are some information in the system, such as the information, the In the current year, you can see that the information of the special parts of this year is affected, and the data is generated. This is the best way to achieve the best results. The in vitro machine can maintain the activity of extracellular secretion and make sure that the cells are safe and reliable. The purpose of this study is to make use of the RNA method to detect the inhibition effect. In the first place, the infection was caused by the infection of the cells, and the success of the disease. This means that you can analyze the complex number in the cell, the complex number in the cell, the degree of dependency, the child, the PCR, the parser. The results show that the data of a specific subgroup is dependent on the temperature of the subgroup, the use of radioisotopes, the use of radioisotopes, the measurement of the rate of measurement, and the determination of the probability of measurement.