Sandwich ELISA assay using antibody and lectin for early detection of pancreatic cancer

使用抗体和凝集素进行夹心 ELISA 检测以早期检测胰腺癌

• 批准号: 17H06551
• 负责人: 下村 治
• 金额: $ 1.75万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2017
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2017-08-25 至 2019-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17H06551/
• 关键词: 膵臓癌; 早期診断; 糖タンパク; レクチン; ELISA; 糖鎖; 早期診断法

本研究は膵癌患者血清から癌細胞由来の糖蛋白の検出を行い、蛋白と糖鎖の両方の側面から認識することで、特異性を挙げて膵癌の早期診断を目指すことを目的とするものである。我々が発見した膵癌細胞に特異的に反応するレクチン（糖結合タンパク）（Shimomura O et al., Molecular Cancer Therapeutics 2018）と特定のタンパクに対する抗体を用いたELISAを行い、筑波大学附属病院の倫理委員会の承認を得て入手した複数の膵癌患者血清から癌細胞由来の糖蛋白の検出に成功した。さらに、膵癌以外の癌患者血清に関しても同手法を用いて測定を行い、胆管癌と大腸癌の一部の患者でも検出に成功した。癌細胞由来の糖蛋白は抗体＋レクチンによるサンドイッチアッセイにより、コントロール（PBS）と比較し患者血清では有意に高いシグナルを検出し、さらに術後の血清ではシグナルが減少し、再発時にシグナルが再上昇することを確認することができた。これらは4人の患者でパイロット的に行ったものであり、今後症例数を増やして解析すると共に、より検出感度を挙げる工夫を行っている。具体的には用いた抗体やレクチンをより特異性の高いものに変更する系や、異なるレクチンを2種類用いる手法（若手研究として継続申請）などでより感度、特異度を挙げる方法を考案中である。最適な測定方法を同定し、まず膵癌細胞株を用いた培養上清での測定を行い、膵癌マウスモデルを用いた癌の進行度に応じた血清採取を行い、より正確な診断法に繋げる予定である。

The aim of this study was to identify the expression of glycoproteins in serum from cancer patients, to identify the underlying mechanisms of protein and glycoproteins, and to identify the specificity of glycoproteins for early diagnosis of cancer. We have found that cancer cell-specific anti-tumor drugs (sugar binding drugs)(Shimomura O et al., Molecular Cancer Therapeutics 2018) and the successful detection of glycoproteins in the sera of a number of cancer patients In addition, some patients with cholangiocarcinoma and colorectal cancer were successfully detected by the same method. Cancer cell-derived glycoprotein antibody + antibody The number of cases in the future will increase, and the sensitivity will increase. The specific method of using antibody, antibody The optimal assay method is to determine whether the tumor cell line is cultured in the supernatant, whether