新規臓器欠損法による異種キメラ動物を用いた腎臓の作成

使用新型器官缺失方法使用异种嵌合动物创建肾脏

• 批准号: 17H06868
• 负责人: 由利 俊祐
• 金额: $ 1.75万
• 依托单位: Nara Institute of Science and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2017
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2017-08-25 至 2019-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17H06868/
• 关键词: 異種間キメラ; 腎臓; 臓器欠損

本研究では、「①:新たな臓器欠損モデルの構築方法により、腎臓を欠損するマウスを作成する」ことと、「②:①で作り出した腎臓欠損マウスを用いて、マウス-ラットの異種間キメラにおいてラットの腎臓をマウスの体内で作製すること」を計画している。平成２９年度には、腎臓前駆細胞欠損マウスを作成した。まず本研究計画で選択した遺伝子が腎臓前駆細胞へ選択的に局在するかを調べるために、GFPノックインマウスラインを樹立した。ノックインは、CRISPER/Cas9 システムを用いて効率化を図ったため、従来法と比較して高効率にノックインマウスのラインを樹立することができた。その結果、選択した遺伝子は腎臓前駆細胞へ選択的に局在することが確認できた。次に、この遺伝子依存的に、腎臓前駆細胞を欠損させるため、この遺伝子のプロモーター下へ致死性遺伝子をノックインしたラインを樹立した。このラインを用いて、腎臓前駆細胞がなくなった際に、腎臓が欠失するか確認したところ、腎臓の欠損が確認されたことから、致死性遺伝子依存的な臓器欠損システムが、本研究計画において予想した通りに機能していることを確認することができた。さらに、この腎臓が欠損するマウス胚盤胞を用いて、マウスのES細胞を補完することで、腎臓がES細胞由来となることを確認することができた。現在は、この腎臓が欠損するマウス胚盤胞を用いて、ラットのES細胞を補完することで、腎臓がラットES細胞由来となるかどうかを調べているところである。

The purpose of this study is: "①: Construction method of new たな铓 device defective モデルのにより, kidney臓を无码するマウスを成する」ことと、「②:①で为り出したKidney deficiency, マウスをいて, マウス-ラットのdifferent species キメラにおいてラットの神臓をマウスの内でproducedすること」をplanしている. In Heisei 29, this product was made with a defective kidney cell defect. The results of this research project are based on the selection of pre-renal cells.るかを动べるために、GFPノックインマウスラインをEstablishment した.ノックインは、CRISPER/Cas9システムを Use いて Efficiency を図ったため、従来法とComparison してHigh Efficiency is a good thing. The results of the selection and selection of the kidney cells are confirmed in the selection process. The sub-dependent に, こ の 伝 sub-dependent に, the kidney cells in front of the kidney are damaged さ せ る た め, こ の 伝子のプロモーター下へ fatal remains 伝子をノックインしたラインをEstablishmentした.このラインを Use いて, kidney 臓前槆 cells がなくなった记に, kidney 蓓がThe loss of money is confirmed, and the kidney damage is confirmed. , the cause of death-related organ failure, this research projectいてyuthinksした通りにfunctionしていることをconfirmすることができた.さらに、このKidungengがdeficiency するマウスblastoderm cells を Use いて、マウスのES cells をCompleted the supplement and confirmed the origin of ES cells of kidney cells. Nowadays, the damaged kidney cells of は、この燓がare replaced with いて、ラットのES cells.ることで, ES cells originate from となるかどうかを动べているところである.