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Angptl2 と骨粗鬆症や歯周炎の発症との関連性についての研究

Angptl2与骨质疏松、牙周炎发病关系的研究

基本信息

批准号：
17H06952
负责人：
高野愛子
金额：
$ 1.75万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
财政年份：
2017
资助国家：
日本
起止时间：
2017-08-25 至 2019-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究の目的は、angiopoietin like protein 2 (Angptl2) と骨粗鬆症や歯周炎の発症の関連性を基礎研究の面から明らかにすることである。Angptl2 が骨代謝に及ぼす影響を検討するため、以下の実験計画を立案した。まず、①正常マウスの長管骨骨髄より単離・培養したBMMSCs のAngptl2 及びそのレセプターの発現レベルを確認する。次に、②BMMSCs を用いた骨芽細胞誘導培養条件下及び脂肪細胞誘導培養条件下において、リコンビナント Angptl2 の骨芽細胞の分化並びに脂肪細胞分化に及ぼす影響を検討する。過剰発現細胞を作製し、検証する。更に、③BMMSCs とマクロファージを用いた共培養系において、リコンビナントAngptl2 が破骨細胞分化に及ぼす影響を検討する。また、④マクロファージを用いたM-CSF-RANKL 刺激系において、リコンビナント Angptl2 の破骨細胞分化に及ぼす影響を検討する。当初、上記の研究計画での実験の実施を試みたが、マウス長管骨骨髄から単離したBMMSCsの状態が極めて悪く、計画通りの実験を試みることが難しかった。そこで、マウス骨髄から細胞を単離する代わりに、マウス骨髄由来未分化間葉系幹細胞株ST2を用いた。新たな研究計画として①ST2の骨芽細胞分化誘導前、分化誘導後1日目、分化誘導後３日目の時点でAngptl2をノックダウンし、骨芽細胞分化マーカー及び脂肪細胞分化マーカーの発現に及ぼす影響を検討する。とした。結果、リアルタイムPCR法にて、ST2において骨芽細胞分化誘導後１日目で最も骨芽細胞分化マーカーの抑制、脂肪細胞分化マーカーの発現亢進が見られた。Angptl2が間葉系幹細胞からの骨芽細胞分化を促進する役割を果たす可能性を示す重要なデータと考える。

The purpose of this study was to investigate the relationship between angiopoietin-like protein 2 (Angptl2) and the development of rough osteoporosis and periodontitis. Angptl2 bone metabolism and its effects are discussed below. To confirm the development of Angptl2 and Angptl 2 in BMMSCs cultured in vitro Secondly, the effects of BMMSCs on the differentiation of bone bud cells and adipocytes under the induction culture conditions of bone bud cells and adipocytes were studied. Production and verification of hidden cells. In addition, BMMSCs and osteoclast differentiation were studied in co-culture system. To investigate the effects of M-CSF-RANKL stimulation on osteoclast differentiation and differentiation of Angptl2 cells. At the beginning, the implementation of the above research plan was tested, and the status of BMMSCs was extremely difficult. The stem cell line ST2 is derived from undifferentiated mesenchymal stem cells. The new research plan includes: (1) To investigate the effects of Angptl2 on the development of osteoblast differentiation and adipocyte differentiation before induction, 1 day after induction, and 3 days after induction of ST2 osteoblast differentiation.とした。As a result, one day after ST2 induction of bone bud cell differentiation using the RIARTAME PCR method, the most significant inhibition of bone bud cell differentiation and increased development of adipocyte differentiation were observed. Angptl2 is an important factor in promoting mesenchymal stem cell differentiation and bone bud differentiation.