CRMP2を標的とした多系統委縮症の病態解明および治療法開発

【MSAと他のパーキンソニズム関連疾患におけるtotal CRMP2,リン酸化CRMP2を免疫組織学的手法，ウェスタンブロッティングを用いた検討】①免疫組織学的検討：コントロールとMSA,PDの脳切片におけるtotal CRMP2,リン酸化CRMP2の発現について検討を行ったところ、MSAではtotal CRMP2,リン酸化CRMP2の発現が上昇していた。MSAの脳切片に対し、蛍光組織染色にてtotal CRMP2、リン酸化CRMP2、オートファジーマーカーLC3、リン酸化αシヌクレインで染色を行ったところ、total CRMP2、リン酸化CRMP2はLC3、リン酸化αシヌクレインと一部共局在を示した。また、PDでも軽度total CRMP2,リン酸化CRMP2の発現が上昇していたが、MSAと比較すると軽度であった。②凍結脳におけるtotal CRMP2,リン酸化CRMP2のウェスタンブロッティングを用いた検討：凍結脳（前頭前野、小脳皮質、小脳白質、中脳）をfractionationし、可溶分画、不溶分画に分け、それぞれの分画におけるtotal CRMP2,リン酸化CRMP2の発現について検討を行った。前頭前野の不溶分画においてリン酸化CRMP2については発現のばらつきがあり一定の傾向は得られなかったが、total CRMP2の発現がMSA,PDで上昇傾向であった。一方可溶分画においてはリン酸化CRMP2はMSA,PDで低下傾向を示した。

【MSAと他のパーキンソニズム関連疾患におけるtotal CRMP2,リン酸化CRMP2を免疫組織学的手法，ウェスタンブロッティングを用いた検討】①免疫組織学的検討：コントロールとMSA,PDの脳切片におけるtotal CRMP2,リン酸化CRMP2の発現について検討を行ったところ、MSAではtotal CRMP2,リン酸化CRMP2の発現が上昇していた。MSAの脳切片に対し、蛍光組織染色にてtotal CRMP2、リン酸化CRMP2、オートファジーマーカーLC3、リン酸化αシヌクレインで染色を行ったところ、total CRMP2、リン酸化CRMP2はLC3、リン酸化αシヌクレインと一部共局在を示した。また、PDでも軽度total CRMP2,リン酸化CRMP2の発現が上昇していたが、MSAと比較すると軽度であった。②凍結脳におけるtotal CRMP2,リン酸化CRMP2のウェスタンブロッティングを用いた検討：凍結脳（前頭前野、小脳皮質、小脳白質、中脳）をfractionationし、可溶分画、不溶分画に分け、それぞれの分画におけるtotal CRMP2,リン酸化CRMP2の発現について検討を行った。前頭前野の不溶分画においてリン酸化CRMP2については発現のばらつきがあり一定の傾向は得られなかったが、total CRMP2の発現がMSA,PDで上昇傾向であった。一方可溶分画においてはリン酸化CRMP2はMSA,PDで低下傾向を示した。