Reconstitution of cell-free protein maturation system coupled with translation system.

与翻译系统耦合的无细胞蛋白质成熟系统的重建。

• 批准号: 18201040
• 负责人: UEDA Takuya
• 金额: $ 33.11万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18201040/
• 关键词: 無細胞蛋白質合成系; リボソーム; シャペロン; フォールディング; 分泌蛋白質; 膜蛋白質; 生体外蛋白質合成系; フォールデング; GroEL; 翻訳後修飾; トリッガーファクター

蛋白質の成熟過程のメカニズム解明することを目標として、再構築した蛋白質合成系PURE systemによって大腸菌ゲノム上の全蛋白質(4132個)の合成を行い、各蛋白質の凝集特性を遠心分離により可溶性を評価した。PURE systemにより合成可能また電気泳動可能であった7割についての評価したところ、凝集しやすさは二峰性を示すことが示された。分子量が小さい蛋白質、等電点が低い蛋白質は可溶性が高いことが示された。また、細胞質の凝集傾向のある蛋白質792個について、シャペロン存在下のPURE systemで合成を行い、その可溶性の向上から、シャペロン依存性を評価した。以上の解析結果をe-Solデータベースとして公開した(http://tp-esol.genes.nig.ac.jp/)。

The process of protein maturation was used to understand that there were 4132 whole protein biosynthesis lines in the protein synthesis system of PURE system bacteria, and the agglutination characteristics of each protein protein were isolated from the soluble proteins. PURE system electrophoretic synthesis is possible. Electrophoretic activity may be detected by electrophoresis. it is possible to detect the temperature, agglutination and bipeaking of the electrophoretic response. Molecular weight, low molecular weight, high molecular weight, low molecular weight, low molecular weight, low Cell agglutination assay showed that there was a significant difference in PURE system synthesis line, soluble protein up-regulation and cell-dependent assay. The results of the above analysis show that the e-Sol is open to the public (http://tp-esol.genes.nig.ac.jp/)).

项目成果

Chaperone properties of mammaliall mitochondrial translation elongation factor Tu

哺乳动物线粒体翻译延伸因子 Tu 的伴侣特性

• 发表时间: 2007
• 期刊: J Biol Chem 282
• 作者: Suzuki;H.;Ueda;T.;Taguchi;H. and Takeuchi;N.
• 通讯作者: N.

Cell-free Expression of Phospholipid-Synthesizing Membrane Proteins in the Interior of Liposomes ーリン脂質の生合成過程に関わる膜蛋白質のリボソーム内合成

脂质体内部磷脂合成膜蛋白的无细胞表达 - 参与磷脂生物合成过程的核糖体内合成膜蛋白

• 发表时间: 2008
• 作者: Yutetsu Kuruma;Pasquale Stano;Takuya Ueda Pier Luigi Luisi
• 通讯作者: Takuya Ueda Pier Luigi Luisi

自己複製可能な人工細胞の構築ー Construction of Self-reproducible Minimal Cell

可自我复制的最小细胞的构建

• 发表时间: 2008
• 作者: Yutetsu Kuruma;Pasquale Stano;Takuya Ueda;Pier Luigi Luisi
• 通讯作者: Pier Luigi Luisi

Real-time monitoring of cell-free translation on a quartz-crystal microbalance.

• DOI: 10.1021/ja9019947
• 发表时间: 2009-06
• 期刊: Journal of the American Chemical Society
• 影响因子: 15
• 作者: Shuntaro Takahashi;Masaaki Iida;H. Furusawa;Y. Shimizu;T. Ueda;Y. Okahata

Epitope Mapping Using Ribosome Display in a Reconstituted Cell-Free Protein Synthesis System

• DOI: 10.1093/jb/mvp027
• 发表时间: 2009-05-01
• 期刊: JOURNAL OF BIOCHEMISTRY
• 影响因子: 2.7
• 作者: Osada, Eriko;Shimizu, Yoshihiro;Ueda, Takuya
• 通讯作者: Ueda, Takuya