新規癌細胞特異的人工ウイルスの効率的細胞内導入法の開発

新型癌细胞特异性人工病毒高效细胞内导入方法的开发

• 批准号: 21890182
• 负责人: 真鍋 達也
• 金额: $ 1.66万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21890182/
• 关键词: 癌; ウイルス; トランスレーショナルリサーチ

本研究は、アデノウイルスの細胞内侵入機序を明らかにすることでアデノウイルス侵入機構を模倣した薬剤内包型新規機能化人工ウイルスを作成し、導入効率制御を有する新たなDDSを確立することである。本年度我々は、以下の2点について明らかにした。1.膵癌におけるアデノウイルスエンドサイトーシス経路の解明:アデノウイルスの細胞内侵入に関わる分子として報告されているCoxackie virus and adenovirus receptor(CAR)、integrin αv, integrin β3, integrin β5, dynamin 2の膵癌における発現状況を調べた。すると、integrin β3がintegrin β5と比較し著しく高発現した膵癌ではアデノウイルス導入遺伝子の発現が低下していることがわかった。また、integrin β3をsiRNAを用いて抑制すると、アデノウイルスの細胞内導入効率が増強することがわかり、integrin β3が、さまざまな薬剤のendocytosisのkey分子であることが考えられた。2.薬剤内包化人工ウイルスの作成:我々が用いる人工ウイルスは古細菌が作るsmall heat shock protein(Mj285)で、24量体を形成し外径12nmで10nmの内孔を有する人工ナノウイルス粒子である。本年度、現在膵癌の第一選択薬であるゲムシタビンを用いて、人工ウイルスへの薬剤内包試験を行った。結果、55度30分100倍モルのGEMと混合することで10倍モルのGEMの内包化に成功した。次年度は、intgrinβ3のsiRNAをGEM内包化至適条件に合わせて内包化し導入効率制御能を有する人工ウイルスを完成させ、コントロール人工ウイルスとの細胞内導入比較試験を行い機能評価する。また、作成した人工ウイルスにGEMを内包化し、in vivoにおける検証を行う。

In this study, we aim to clarify the mechanism of cellular invasion, establish a new DDS for introducing efficiency control, and establish a new DDS for simulating the mechanism of cellular invasion. This year, I will go to the following two points: 1. Understanding of the cellular pathways involved in cancer development: molecular mechanisms involved in the intracellular invasion of tumor cells were reported to modulate the development of cancer by Coxackie virus and adenovirus receptor(CAR), integrin αv, integrin β3, integrin β5, dynamin 2. The expression of integrin β3 and integrin β5 is relatively high. The efficiency of intracellular introduction of integrin β3 siRNAs is enhanced by the use of integrin β3 siRNAs. 2. The preparation of artificial particles in the package: We use artificial particles in the form of small heat shock protein(Mj285) and 24-volume particles with an outer diameter of 12nm and an inner hole of 10nm. This year, the first selection of cancer drugs was carried out in China, and the first selection of drugs was carried out in China. As a result, 55 degrees, 30 minutes and 100 times of GEM mixing were successfully achieved. In the next year, we will conduct a functional evaluation of the recombinant plasmid containing intgrinβ3 siRNAs to the appropriate conditions. This is the first time I've ever seen a woman.