個別化医療の臨床応用を目指した胆道癌同所移植マウスモデルの開発

本研究の目的は、未開発の胆道癌の患者由来腫瘍同所移植（Patient Derived tumor Orthotopic Xenograft：以下、PDOX）マウスモデルの確立である。マウス胆管への有効なカテーテルの挿入法の確立と癌細胞を胆管内へ注入することで移植可能かという点についてまず検討を行う方針としている。最終的には患者由来胆道癌細胞をヌードマウス胆管内へ移植し、生着させ腫瘍の進展や悪性度の評価を行うことを目指す。このモデルは個別化医療を目的とした情報集積のツールとして利用可能である。令和4年度はマイクロカニュレーションシステムを用いてマウス胆管へカニュレーションを行い、細胞外マトリックスゲルに混ぜたヒト胆管細胞株のHUCCT-1を注入し生着の度合いを観察した。動物用エコーVevo2100を用いて週1回胆管および肝臓を観察した。さらにマウス血清CA19-9の測定を行った。HUCCT-1の細胞数や観察期間の調整を行ったが、結果的には生着が得られなかった。そのため、当初の予定に準じて一旦腫瘍をオルガノイド化した後に胆管へ移植を行う方針とした。臨床試験の倫理審査通過後に同意を得られた胆管癌患者の手術検体から腫瘍を採取。採取した腫瘍細胞の一部をsingle cellに処理し、細胞外マトリックスゲル内で培養しオルガノイドとして初代培養を行った。培地の調整を行なった結果、約60%の確率でオルガノイド化することができた。手術検体から採取した腫瘍片のうち、オルガノイド作成に使用したもの以外はマウス皮下に接種し継代して維持するようにしている。

本研究の目的は、未開発の胆道癌の患者由来腫瘍同所移植（Patient Derived tumor Orthotopic Xenograft：以下、PDOX）マウスモデルの確立である。マウス胆管への有効なカテーテルの挿入法の確立と癌細胞を胆管内へ注入することで移植可能かという点についてまず検討を行う方針としている。最終的には患者由来胆道癌細胞をヌードマウス胆管内へ移植し、生着させ腫瘍の進展や悪性度の評価を行うことを目指す。このモデルは個別化医療を目的とした情報集積のツールとして利用可能である。令和4年度はマイクロカニュレーションシステムを用いてマウス胆管へカニュレーションを行い、細胞外マトリックスゲルに混ぜたヒト胆管細胞株のHUCCT-1を注入し生着の度合いを観察した。動物用エコーVevo2100を用いて週1回胆管および肝臓を観察した。さらにマウス血清CA19-9の測定を行った。HUCCT-1の細胞数や観察期間の調整を行ったが、結果的には生着が得られなかった。そのため、当初の予定に準じて一旦腫瘍をオルガノイド化した後に胆管へ移植を行う方針とした。臨床試験の倫理審査通過後に同意を得られた胆管癌患者の手術検体から腫瘍を採取。採取した腫瘍細胞の一部をsingle cellに処理し、細胞外マトリックスゲル内で培養しオルガノイドとして初代培養を行った。培地の調整を行なった結果、約60%の確率でオルガノイド化することができた。手術検体から採取した腫瘍片のうち、オルガノイド作成に使用したもの以外はマウス皮下に接種し継代して維持するようにしている。