家兎膝骨軟骨欠損モデルに対する末梢血由来と骨髄由来多血小板フィブリンの効果

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立案した研究実施計画に準じ，家兎膝骨軟骨欠損モデルに対して末梢血由来多血小板フィブリン（P-PRF）と骨髄由来多血小板フィブリン（BM-PRF）の骨軟骨効果について実験を遂行している．まず，予備実験としてニュージーランド白色家兎を3羽用いて，動物実験施設の方々と協力して，手術器具や必要物品の購入をして，右膝蓋骨溝に幅4mm，深さ3mmの骨軟骨欠損を作製できることを確認した．また，P-PRFやBM-PRFの作製可能であることも確認した．次に本実験として，36羽を対照群，P-PRF群，BM-PRF群の3群（各群12羽）に分け手術を施行した．対照群は，右膝蓋骨溝に骨軟骨欠損（幅4mm，深さ3mm）を作製した．P-PRF群では，耳介動脈から採血した動脈血5mlをガラス管に入れ，1640gで10分間遠心分離しP-PRFを作製し，骨軟骨欠損部に充填した．BM-PRF群では，腸骨から採取した骨髄液5mlをガラス管にに入れ，1640gで10分間遠心分離しBM-PRFを作製し，骨軟骨欠損部に充填した．各群とも術後4週（n=6）と術後12週（n=6）時に安楽死させ，骨軟骨修復状況についてマイクロCT解析，病理組織学評価を行った．マイクロCT解析の結果，術後12週時，BM-PRF群では軟骨下骨が他の2群よりも良好に再生されていた．また，組織学的評価（HE染色やサフラニンO染色，コラーゲン1型，2型免疫染色）の結果，BM-PRF群では骨軟骨欠損部は硝子様軟骨組織で修復されていたが，他の２群では線維様軟骨組織で修復されていた．現在，4週時の病理組織学的評価を用いて，TGF-βやVEGFなどの免疫染色を行い，BM-PRF群の修復促進の機序について継続して研究を行っている．