精子幹細胞の分化過程における甲状腺機能の役割の解明

阐明甲状腺功能在精子干细胞分化过程中的作用

• 批准号: 21K20993
• 负责人: 松本 大輔
• 金额: $ 2万
• 依托单位: Nagoya City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-08-30 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K20993/
• 关键词: 精巣器官培養; 甲状腺ホルモン; 精子形成過程; 不妊; 器官培養; 甲状腺機能; 精子幹細胞; 男性不妊症

男性不妊症の原因の9割は特発性の精子形成障害だが、その全容は未だ解明されていない。精子幹細胞は幼若期に分化し、その細胞数が規定され、精子の供給源として重要である。私たちは、これまで停留精巣における精子幹細胞の分化異常について研究を進めてきた。その過程で、甲状腺機能低下症を合併した症例では精子幹細胞数が有意に増加することを見出した。そこで本研究の目的は、精子幹細胞の分化過程における甲状腺機能の役割の解明とした。本研究では、精巣組織を体外で培養する器官培養系を確立し、甲状腺ホルモンによる精巣構成細胞の形質変化をフローサイトメトリーやマイクロアレイなどを用いて解析する。本研究の成果は、精子幹細胞の分化・増殖過程の解明につながる。さらに、甲状腺機能の評価による男性不妊症のリスク予測や、新規治療薬開発が期待できると考えた。 上記の研究目的と研究実施計画に沿って研究を開始し、引き続き幼若期ラット精巣の最適な器官培養環境を模索している。培養環境により精巣組織に異なる変化がみられており、組織学的な観点からと、分子生物学的な観点から比較検討を開始している。また、培養した精巣組織の分化・増殖の状態を評価するための最適な免疫染色マーカーを探索しており、生殖細胞に関しては抗DDX-4抗体や抗GFRα1抗体などを用いて発達段階の違いを染め分け、セルトリ細胞については抗AMH抗体や抗Sox9抗体などを候補としている。

The nine causes of male infertility are divided into idiopathic sperm formation disorders, but the full scope of the disease is still unclear. Sperm stem cell differentiation at immature stage, the number of sperm cells is regulated, and the sperm supply is important. The study of sperm stem cell differentiation abnormality is progressing. The number of sperm stem cells increased intentionally due to hypothyroidism. The purpose of this study is to clarify the differentiation process of sperm stem cells and the function of thyroid gland. In this study, we established an organ culture system for sperm tissue culture in vitro, and analyzed the morphological changes of sperm cells in vitro. The results of this study are related to the understanding of differentiation and proliferation of sperm stem cells. In addition, the evaluation of thyroid function, male infertility, and new treatment development expectations The purpose of this study is to establish an optimal culture environment for organ culture at the beginning of the study. Culture environment, tissue differentiation, histology, molecular biology, comparative study To evaluate the differentiation and proliferation status of sperm tissue in culture, the optimal immunostaining method was explored. For germ cells, anti-DDX-4 antibody and anti-GFR α1 antibody were used to develop the stage of differentiation, and anti-AMH antibody and anti-Sox 9 antibody were used as candidates.