肺高血圧合併肺線維症モデル樹立とその解析手法の確立

肺纤维化合并肺动脉高压模型的建立及其分析方法

• 批准号: 22K20774
• 负责人: 柳原 豊史
• 金额: $ 1.83万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-08-31 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K20774/
• 关键词: 肺線維症; 肺高血圧症; ブレオマイシン; 肺高血圧合併肺線維症; マウスモデル

慢性進行性に肺の線維化を来す特発性肺線維症の予後は3-4年程度と悪く、更に肺高血圧症を合併した場合の生命予後は極めて悪い。申請者は「特発性肺線維症における肺血管リモデリングが、肺線維症の病態進行に関与している」と仮説を立て、本研究を企画した。本研究では、(1)ブレオマイシン反復投与による肺高血圧合併肺線維症マウスモデルを樹立する。 (2)肺血管構成細胞と繊維芽細胞の共培養系を確立し、両者の相互作用を解析する。(3)同マウスモデル肺を薄切または脱細胞化した上で、血管構成細胞をその中で培養し、性質変化を解析する。性質変化の背景にある分子機序をフローサイトメトリー、PCR、マイクロアレイや質量解析を用いて同定を試みる。初年度は、ブレオマイシン反復投与による肺高血圧合併肺線維症マウスモデルの樹立を試みた。ブレオマイシン単回投与群では、C57BL6 10週齢雌マウスにブレオマイシン2mg/kgを気管内投与し、３週間後にsacrificeした。２回投与群では1.2mg/kgを気管内投与し、２週間後にブレオマイシン2mg/kgを気管内再投与し３週間後にsacrificeした。マッソントリクローム染色で肺繊維化を評価したところ、ブレオマイシン１回投与群に比べ、２回投与群はより強い線維化を呈していた。更に、２回投与群で肺動脈壁肥厚が認められた。２年目は肺線維化の程度、肺動脈壁肥厚の定量化を行い、肺高血圧合併肺線維症のモデルマウスとして使用可能か評価を行う。また肺組織より肺繊維芽細胞、肺動脈平滑筋細胞、肺血管内皮細胞をそれぞれ単離し、共培養系を確立、両者の相互作用を確認する予定である。

Chronic progressive lung disease is associated with idiopathic lung disease. 3-4 years later, patients with pulmonary hypertension are complicated with severe lung disease. The applicant was diagnosed with idiopathic pulmonary vascular disease, pulmonary vascular disease and pulmonary vascular disease. The main results of this study were as follows: (1) in this study, the following results were obtained: (1) the results of this study were as follows: (1) in this study, (1) the results of this study were as follows: (1) in this study, (1) the results of this study were as follows: (1) in this study, (1) the results of this study were as follows: (1) the results of this study were as follows: (1) in this study, the following results were obtained. (2) the co-culture system of pulmonary vascular formation, cell growth and germ cell co-culture is established, and the interaction between cells is analyzed. (3) in the same way, the lung is thinly cut, the cells are decellularized, the blood vessels are formed, the cells are cultured, and the sex is analyzed. The molecular mechanism of sexual transformation, the molecular order, the molecular mechanism, the molecular order, the molecular order, the At the beginning of the year, there was a high blood pressure in the lungs and a high blood pressure in the lungs in the first year. C57BL6 10