肺高血圧合併肺線維症モデル樹立とその解析手法の確立
肺纤维化合并肺动脉高压模型的建立及其分析方法
基本信息
- 批准号:22K20774
- 负责人:
- 金额:$ 1.83万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
- 财政年份:2022
- 资助国家:日本
- 起止时间:2022-08-31 至 2024-03-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
慢性進行性に肺の線維化を来す特発性肺線維症の予後は3-4年程度と悪く、更に肺高血圧症を合併した場合の生命予後は極めて悪い。申請者は「特発性肺線維症における肺血管リモデリングが、肺線維症の病態進行に関与している」と仮説を立て、本研究を企画した。本研究では、(1)ブレオマイシン反復投与による肺高血圧合併肺線維症マウスモデルを樹立する。 (2)肺血管構成細胞と繊維芽細胞の共培養系を確立し、両者の相互作用を解析する。(3)同マウスモデル肺を薄切または脱細胞化した上で、血管構成細胞をその中で培養し、性質変化を解析する。性質変化の背景にある分子機序をフローサイトメトリー、PCR、マイクロアレイや質量解析を用いて同定を試みる。初年度は、ブレオマイシン反復投与による肺高血圧合併肺線維症マウスモデルの樹立を試みた。ブレオマイシン単回投与群では、C57BL6 10週齢雌マウスにブレオマイシン2mg/kgを気管内投与し、3週間後にsacrificeした。2回投与群では1.2mg/kgを気管内投与し、2週間後にブレオマイシン2mg/kgを気管内再投与し3週間後にsacrificeした。マッソントリクローム染色で肺繊維化を評価したところ、ブレオマイシン1回投与群に比べ、2回投与群はより強い線維化を呈していた。更に、2回投与群で肺動脈壁肥厚が認められた。2年目は肺線維化の程度、肺動脈壁肥厚の定量化を行い、肺高血圧合併肺線維症のモデルマウスとして使用可能か評価を行う。また肺組織より肺繊維芽細胞、肺動脈平滑筋細胞、肺血管内皮細胞をそれぞれ単離し、共培養系を確立、両者の相互作用を確認する予定である。
Chronic progressive に pulmonary radionation を to す specific pulmonary radionation <s:1> in cases of <s:1> 3-4 years later と悪く and more に pulmonary hyperhypertension を combined with <s:1> た the life is later <s:1> extremely めて悪 めて悪. Applicants は "発 sex disease of lung line d に お け る pulmonary vascular リ モ デ リ ン グ が, lung line d の pathological for に masato and し て い る" と 仮 said を て, this research を enterprise し た. In this study, repeated administration of で で and (1)ブレ and ブレ and シ シ combined with による pulmonary hyperhypertension and pulmonary line disease する ウスモデ and を established する. (2) Co-culture line of pulmonary vascular constituent cells と繊 and vascular bud cells <s:1> を establishment of the interaction between <s:1> and を analysis する. (3) with マ ウ ス モ デ ル lung を thin slice ま た は off cellular し た で, vascular cells を そ の で し, property variations in を parsing す る. Nature - the の background に あ る molecular machine sequence を フ ロ ー サ イ ト メ ト リ ー, PCR, マ イ ク ロ ア レ イ や quality analytical を with い て be を try み る. In the first year, <s:1>, ブレ, ブレ, シ, シ, シ were repeatedly given to による pulmonary hyperhypertension combined with pulmonary line disease, <s:1> ウスモデ and <s:1> to establish a を test みた. ブ レ オ マ イ シ ン 単 backing up with group of で は, C57BL6 10 weeks 齢 female マ ウ ス に ブ レ オ マ イ シ ン 2 mg/kg を 気 cast tube and し, three weeks after に sacrifice し た. Cast and group 2 back で は 1.2 mg/kg を 気 cast tube and し, 2 weeks after に ブ レ オ マ イ シ ン 2 mg/kg を 気 tube to pitch between し 3 weeks after に sacrifice し た. マ ッ ソ ン ト リ ク ロ ー ム dyeing で lung 繊 dimensions を review 価 し た と こ ろ, ブ レ オ マ イ シ ン 1 back with group of に べ, 2 back shots with group of は よ り strong い line d を show し て い た. Further に, 2 reperfusion and group で pulmonary artery wall hypertrophy が recognition められた. 2 years は lung line d の degree and pulmonary artery wall hypertrophy の quantitative を line い, high blood 圧 with pulmonary lung line d の モ デ ル マ ウ ス と し て use may か review 価 う を line. Youdaoplaceholder0 lung tissue よ である pulmonary 繊 germ cells, pulmonary artery smooth tendon cells, pulmonary vascular endothelial cells をそれぞれ単 isolated from よ, co-culture line を established, the <s:1> interaction between the two を confirmed する determined である.
项目成果
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