TELO2を標的とした悪性ラブドイド腫瘍に対する合成致死療法の基盤形成

为靶向TELO2的恶性横纹肌瘤合成致死治疗奠定基础

• 批准号: 22K20800
• 负责人: 米澤 穂波
• 金额: $ 1.75万
• 依托单位: Iwate Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-08-31 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K20800/
• 关键词: 悪性ラブドイド腫瘍; TELO2; 阻害剤; イベルメクチン

申請者は、抗寄生虫薬イベルメクチンがmTOR複合体を含むPIKKsの安定化に必須の因子であるTELO2に結合し、そのタンパク質レベルを低下させることを明らかにした。その後のデータベース解析により、複数の悪性ラブドイド腫瘍（malignant rhabdoid tumor, MRT）細胞株の増殖がTELO2に依存する可能性を見出した。MRTは、主に小児に発生する非常に予後の悪い希少がんであるが、標準治療は確立されておらず、有効な治療法の開発が重要な課題である。本研究では、「イベルメクチンはTELO2タンパク質レベルを低下させ、SMARCB1の欠損を特徴とするMRT細胞の合成致死を引き起こす」という仮説を立て、MRTに対するイベルメクチンの有効性を明らかにすることを目的とする。2022年度は、イベルメクチンのMRT細胞に対する増殖阻害作用を明らかにした。また、MRT細胞において、イベルメクチンがTELO2およびその関連タンパク質のタンパク質レベルを低下させることも明らかにした。さらに、次年度の研究に使用するため、内在性TELO2をCRISPR-Cas9によってノックアウトしたMRT細胞を作製し、野生型TELO2またはイベルメクチン非結合型TELO2変異体によって再構成した。現在のところ、野生型TELO2による再構成MRT細胞を1クローン、イベルメクチン非結合型TELO2変異体による再構成MRT細胞を2クローン樹立することに成功している。2023年度は、これらのクローン細胞を用いて、イベルメクチンによる増殖阻害作用やTELO2減少作用について評価する。

申请人发现，抗寄生虫药物伊维菌素与Telo2结合，Telo2是稳定甲状管（含有MTOR复合物）并降低其蛋白质水平的重要因素。随后的数据库分析表明，多种恶性横纹肌肿瘤（MRT）细胞系的增殖可能取决于Telo2。 MRT是一种罕见的癌症，预后较差，主要发生在儿童中，但尚未确定标准疗法，而有效治疗的发展是一个重要的问题。在这项研究中，我们假设“ ivermectin降低了Telo2蛋白水平，并导致以SMARCB1缺乏症为特征的MRT细胞中的合成致死性”，旨在澄清ivermectin对MRT的有效性。在2022年，我们阐明了伊维菌素对MRT细胞的生长抑制作用。还揭示了伊维菌素会降低MRT细胞中TELO2及其相关蛋白质的蛋白质水平。此外，用CRISPR-CAS9撞倒的内源性Telo2在明年的研究中使用，并用野生型Telo2或ivermectin-unbound-unbound telo2突变体进行了重构。目前，我们已经成功地建立了一个用野生型Telo2的重构的MRT细胞，并用无依伐素的Telo2突变体的两个重构的MRT细胞克隆。在2023财年，这些克隆的细胞将用于评估伊维菌素的生长抑制作用和Telo2还原作用。