CRISPR screen reveals novel target genes in prostate cancer

CRISPR 筛选揭示了前列腺癌的新靶基因

• 批准号: 22K20806
• 负责人: 辻野 拓也
• 金额: $ 1.83万
• 依托单位: Osaka Medical and Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-08-31 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K20806/
• 关键词: 前立腺がん; PARP阻害; CRISPRスクリーニング; PARP阻害剤

〈背景と目的〉去勢抵抗性前立腺がん（CRPC）の新たな治療薬であるPARP阻害剤Olaparib（AZD-2281）は現時点で、BRCA1/2変異陽性症例のみに有効性が示されており、その他の有効性を示す遺伝子変異の解明と薬剤抵抗性を示す遺伝子変異の解明、およびその症例への代替治療薬の選択が課題となっている。本研究では、BRCA1/2のような遺伝子バイオマーカー同定および薬剤耐性メカニズム解明による新規治療法開発を目的として前立腺がん細胞株においてOlaparib治療を併用した約19,000遺伝子対象のCRISPRスクリーニングを施行した。〈現在までの実績〉　４つの前立腺がん細胞株におけるCRISPRスクリーニング解析により、その機能喪失によってPARP阻害剤へ高感受性を示す候補遺伝子として67遺伝子、薬剤耐性を示す候補遺伝子として103遺伝子を同定した。高感受性を示す遺伝子変異の中から、前立腺がん患者において約14％にその遺伝子欠失を有するMMS22L遺伝子を同定し、MMS22L欠失細胞モデルにおけるPARP阻害剤への高感受性を実証した。さらにそのメカニズムが相同組み換え修復機構の主要タンパクであるRAD51誘導能減弱に伴うDNA損傷促進であることを解明した。また、薬剤耐性を引き起こす候補遺伝子の中からCHEK2、TP53、E2F7それぞれの欠失細胞がPARP阻害剤へ耐性を示すことを実証し、さらに薬剤耐性のメカニズムとしてCHEK2-TP53-E2F7 経路が引き起こす相同組み換え修復遺伝子の発現上昇を解明した。さらにCHEK2欠失細胞モデルおよび同細胞皮下移植マウスモデルを用いて、その薬剤耐性克服のための代替療法としてATR阻害剤とPARP阻害剤のコンビネーション治療の有効性を実証した。今後さらなる検証を行う予定である。

< > background と purpose castration resistance front gland が ん (CRPC) の new た な treatment 薬 で あ る PARP resistance against tonic Olaparib (AZD - 2281) は now point で, BRCA1/2 - different positive cases の み に have sharper sex が shown さ れ て お り, そ の he の have sharper sex を shown す heritage 伝 sub - different の interpret と 薬 tonic resistance を shown す 伝 For the explanation of the variant of the syndrome and the case of およびそ syndrome, the alternative treatment drug for へ syndrome should be selected from the 択が topic となって る る る. This study で は, BRCA1/2 の よ う な posthumous son 伝 バ イ オ マ ー カ ー with fixed お よ び 薬 tonic patience メ カ ニ ズ ム interpret に よ る open new rules therapy 発 を purpose と し て front gland が ん cell lines に お い て を Olaparib treatment with し た about 19000 legacy 伝 child like の seaborne CRISPR ス ク リ ー ニ ン グ を imposed し た. < now ま で の be performance > 4 つ の front gland が ん cell lines に お け る CRISPR ス ク リ ー ニ ン グ parsing に よ り, そ の disabilities に よ っ て PARP resistance against tonic へ high susceptibility を す alternate in heritage 伝 son と し て 67 legacy 伝, 薬 tonic patience を す alternate in heritage 伝 son と し て 103 legacy 伝 son を be し た. High sensitivity を shown す heritage 伝 child - different の か ら, front gland が ん patients に お い て about 14% に そ の heritage 伝 son owe lost を す る MMS22L heritage 伝 son を with し, MMS22L owe cell loss モ デ ル に お け る PARP resistance against tonic へ の high susceptibility を card be し た. さ ら に そ の メ カ ニ ズ ム が み in same group え repair agency の main タ ン パ ク で あ る RAD51 induced DNA damage can abate に with う promote で あ る こ と を interpret し た. ま た, 薬 tonic patience を lead き up こ す alternate heritage 伝 child の か ら CHEK2, TP53, E2F7 そ れ ぞ れ の owe cell loss が PARP resistance against tonic へ patience を shown す こ と を be し, さ ら に 薬 tonic patience の メ カ ニ ズ ム と し て CHEK2 - TP53 - E2F7 The process of が leads to が, the same group of み is replaced with え to repair the 伝 seed, the <s:1> shows an increase, and を explains the た. さ ら に CHEK2 owe cell loss モ デ ル お よ び cells with subcutaneous transplantation マ ウ ス モ デ ル を with い て, そ の 薬 tonic patient overcome の た め の replacement therapy と し て ATR resistance against tonic と PARP resistance against tonic の コ ン ビ ネ ー シ ョ ン in treatment of の have sharper を card be し た. In the future, さらなる検 certifies を and う shall determine である.

项目成果

前立腺がんPARP 阻害剤治療におけるCRISPR スクリーニングを用いた新規ターゲット遺伝 子の同定

使用 CRISPR 筛选鉴定新靶基因用于前列腺癌 PARP 抑制剂治疗

• 发表时间: 2023
• 作者: 北見和久;吉原雅人;山北由彦;杉山麻衣;小屋美博;藤本裕基;伊吉祥平;宇野枢;茂木一将;玉内学志;池田芳紀;横井暁;芳川修久;西野公博;新美薫;那波明宏;榎本篤;梶山広明;辻野拓也.
• 通讯作者: 辻野拓也.

複数遺伝子変異が及ぼすPARP阻害剤感受性への影響

多基因突变对 PARP 抑制剂敏感性的影响

• 发表时间: 2023
• 作者: 辻野拓也;南幸一郎;小村和正;上原博史;平野 一;能見勇人;稲元輝生;東 治人.
• 通讯作者: 東 治人.