Development of B-cell targeted chimeric antigen receptor-T cells for the treatment of SLE

本研究では、SLEの自己免疫異常においてB細胞が中心的な役割を果たすとの考えのもと、SLEにおいてB細胞の制御を目的とした新しい根治療法の開発が目的である。腫瘍モデルで有効性が証明されているBAFF/BLySの受容体(BAFF-R、BCMA、TACI)を標的としたリガンド型のCAR-T細胞を作成、SLEモデルマウスに投与し、症状・検査所見、抗体産生能などに与える影響を評価する。具体的には、まず、1.BAFF キメラ抗原受容体発現T細胞(BAFF CAR-T細胞)をコンストラクトから作成する。次に、2.作成したBAFF CAR-T細胞を、全身性エリテマトーデス(SLE)のモデルマウスとなるB6 SKGマウスに投与する。最後に3.マウス内でのBAFF CAR-T細胞の動態、治療効果を評価することを目的としている。本年度は主に、1.の予備実験として、マウスの脾臓から細胞を採取して、磁気細胞分離キットを用いてCD8T細胞を分離した。CD8T細胞をサイトカインで刺激後に、CD19CAR DNAをレトロネクチンを用いてトランスフェクションさせ、CD19 CAR-T細胞を作成した。また、2.のB6 SKGマウスと背景が異なるBALB/c SKGマウスにおいて、β-Glucanを投与して関節炎などの表現型が誘発できることを確認した。さらに、β-Glucanの投与量の違いによる関節炎臨床スコアの違いについても検討した。今後はBAFF CAR-T細胞の作成、B6 SKGマウスへの投与を行う予定である。

本研究では、SLEの自己免疫異常においてB細胞が中心的な役割を果たすとの考えのもと、SLEにおいてB細胞の制御を目的とした新しい根治療法の開発が目的である。腫瘍モデルで有効性が証明されているBAFF/BLySの受容体(BAFF-R、BCMA、TACI)を標的としたリガンド型のCAR-T細胞を作成、SLEモデルマウスに投与し、症状・検査所見、抗体産生能などに与える影響を評価する。具体的には、まず、1.BAFF キメラ抗原受容体発現T細胞(BAFF CAR-T細胞)をコンストラクトから作成する。次に、2.作成したBAFF CAR-T細胞を、全身性エリテマトーデス(SLE)のモデルマウスとなるB6 SKGマウスに投与する。最後に3.マウス内でのBAFF CAR-T細胞の動態、治療効果を評価することを目的としている。本年度は主に、1.の予備実験として、マウスの脾臓から細胞を採取して、磁気細胞分離キットを用いてCD8T細胞を分離した。CD8T細胞をサイトカインで刺激後に、CD19CAR DNAをレトロネクチンを用いてトランスフェクションさせ、CD19 CAR-T細胞を作成した。また、2.のB6 SKGマウスと背景が異なるBALB/c SKGマウスにおいて、β-Glucanを投与して関節炎などの表現型が誘発できることを確認した。さらに、β-Glucanの投与量の違いによる関節炎臨床スコアの違いについても検討した。今後はBAFF CAR-T細胞の作成、B6 SKGマウスへの投与を行う予定である。