卵巣高異型度漿液性腺癌の早期発見につながる新規リキッドバイオプシー法の開発

开发一种早期检测卵巢高级别浆液性腺癌的新液体活检方法

• 批准号: 22K20973
• 负责人: 山本 実咲
• 金额: $ 1.83万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-08-31 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K20973/
• 关键词: 卵巣がん; 高異型度漿液性卵巣癌; 子宮内膜症関連卵巣癌; 遊離DNA; デジタルPCR; TP53変異; 環状RNA

令和4年度は高異型度漿液性腺癌の研究に先行して、血漿中に微量に存在するCell Free FNA（cfDNA）が子宮内膜症関連のがんと子宮内膜症性嚢胞の鑑別診断に可能であるかどうかの検討をデジタルPCR法で検討した。明細胞癌（CCC） と類内膜癌（EC）患者計34例の血漿サンプルを治療前に収集した。同時に対側の正常卵巣を収集し、DNAを抽出した。良性コントロールとして、子宮内膜症性嚢胞患者から55例のDNAを収集した。H1047R、E542K、およびE545K変異を PIK3CA変異のホットスポットとして選択した。計34例中、21例がCCCで13例がECであった。次世代シークエンサー解析の結果、それらの中で、卵巣癌組織におけるH1047R変異は 21例のCCC症例中の6例と13例のEC症例中の2例で認められ、腫瘍のE542K変異は21例のCCC症例中2例で検出された。そこで、それらの変異が、患者血漿を用いたデジタルPCR法で検出可能かどうかの検討を行った。結果は、これらすべての変異が治療前の患者血漿より検出された。一方、これらの変異は、良性の嚢胞を持つ55人の患者の血漿では検出されなかった。 したがって、血漿中のPIK3CA変異検出の陽性適中率（PPV）は 100%であったが、感度、特異度、および精度はそれぞれ29.4%、100%、および73.0%であった。また、手術後、これらの変異を伴う10例中7例で変異が消失し、cfDNAが疾患の状態を反映している可能性が示唆された。以上、デジタルPCR法により、PIK3CA変異が、治療前に患者の血漿で検出されることを確認できた。 その高いPPVと特異性を考慮すると、この技術は卵巣癌の非侵襲的バイオマーカーとして適用できると結論に至った。

在2022年，在研究高级浆液性腺癌之前，我们研究了血浆中痕量中存在的无细胞FNA（CFDNA）是否可用于使用数字PCR差异诊断与子宫内膜异位相关的癌症和子宫内膜异位型囊肿。在治疗前，收集了总共34例透明细胞癌（CCC）和子宫内膜类药物癌（EC）患者的血浆样品。同时收集对侧正常卵巢并提取DNA。作为良性对照，从子宫内膜囊肿的患者中收集了55个DNA。选择了H1047R，E542K和E545K突变作为PIK3CA突变的热点。在总共34例中，有21例CCC和13例具有EC。由于下一代测序仪分析的结果，其中有21例CCC病例中的6例和13例EC病例中有2例在卵巢癌组织中发现了H1047R突变，而在21例CCC病例中有2例检测到肿瘤中的E542K突变。因此，我们研究了使用患者血浆数字PCR检测到这些突变。结果表明，在预处理患者血浆中检测到所有这些突变。另一方面，在55例良性囊肿患者的血浆中未检测到这些突变。因此，在血浆中检测PIK3CA突变的阳性预测值（PPV）为100％，而灵敏度，特异性和准确性分别为29.4％，100％和73.0％。此外，手术后，在10例患有这些突变的病例中，突变消失了，表明CFDNA可能反映了该疾病的状况。因此，已经证实，在通过数字PCR治疗之前，在患者的血浆中检测到PIK3CA突变。鉴于其较高的PPV和特异性，我们得出结论，该技术可以用作卵巢癌的非侵入性生物标志物。