骨リモデリング微小環境老化細胞におけるcGAS-STING経路の活性化

骨重塑微环境衰老细胞中cGAS-STING通路的激活

• 批准号: 22K21004
• 负责人: 服部 洋一
• 金额: $ 1.83万
• 依托单位: Hyogo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-08-31 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K21004/
• 关键词: 骨リモデリング; 老化; SASP; cGAS-STING; cGAS - STING経路

骨組織は、骨リモデリングという破骨細胞と骨芽細胞による連関した制御システムによって、その恒常性を保っている。この骨恒常性が破綻すると、骨粗鬆症などの骨代謝性疾患の発症につながり、病態解明、治療のためにも破綻させる因子の特定は急務である。老化も骨恒常性を破綻させる因子であり、今回老化細胞に生じるSASPという現象に着目した。老化細胞が長期残存し炎症性サイトカインなどを分泌する現象をSASPと呼び、このSASP因子が骨細胞、破骨細胞などに作用して骨恒常性を破綻させているのではないかと考えている。申請者らは破骨前駆細胞用細胞においてSASP因子の発現を確認し、分化能に影響が及んだことを確認している。SASPを制御するためにも、SASP誘導経路の特定は必要である。SASPの誘導にcGAS-STING経路の活性化が寄与しているという報告もあり、今回、破骨前駆細胞様細胞であるRAW264.7細胞を用いて、cGAS-STING経路の活性化を評価した。RAW264.7を5、10、20代継代した細胞を用いて比較検討を行った。老化マーカー（SA-β-gal、p53、p-H2AX）の発現およびテロメア長を測定し、RAW264.7が複製老化していることを確認した。これらの細胞を用いて、cGASおよびSTINGのタンパク発現をウエスタンブロット法にて評価した。継代数の増加につれて、cGAS、STINGともに発現の増強を認めた。また、定量的な評価を行うため、cGAS-STING経路にて活性化されるcGAMPの発現量をELISAキットにて測定した。継代数の増加につれて、cGAMPの発現量は増加し、5代目と20代目において発現量に有意差を認めた。RAW264.7細胞において老化とともにcGAS-STING経路の活性化を認め、SASPの誘導経路であることが考えらえる。

The relationship between osteoclast and bone bud cells in bone tissue and its constancy is maintained. The bone constancy, osteoporosis, metabolic bone disease, pathological diagnosis, treatment and other factors of specific urgency. Aging constancy factors are present in aging cells. Aging cells remain inflammatory for a long time, and SASP factors play an important role in bone homeostasis. The applicant shall confirm the expression of SASP factor in cells used for osteoclast, and confirm the influence of differentiation. SASP control system, SASP induction system and specific needs The activation of cGAS-STING pathway induced by SASP was evaluated in RAW264.7 cells. RAW264.7 is a 5-, 10-, and 20-generation cell. Aging (SA-β-gal, p53, p-H2AX) detection, RAW264.7 replication aging The cells were used in the process, and cGAS and STING were used in the process. Increase in generation, cGAS, STING and development cGAMP production was determined by ELISA in the cGAS-STING pathway. The number of generations increased, the occurrence of cGAMP increased, and the occurrence of cGAMP increased significantly between the 5th and 20th generations. RAW264.7 cells aging and activation of cGAS-STING pathway, SASP pathway