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Exploration of cortical neurons involved in periodontal ligament sensation using optical imaging and immunohistochemical staining methods

使用光学成像和免疫组织化学染色方法探索参与牙周膜感觉的皮质神经元

基本信息

批准号：
22K21026
负责人：
小林秀太朗
金额：
$ 1.83万
依托单位：
Nihon University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-08-31 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K21026/
关键词：
歯根膜島皮質イメージング光学計測大脳皮質

项目摘要

マウスの歯根膜に反復刺激を行ったカルシウム応答では、一次体性感覚野（S1）、二次体性感覚野（S2）、IC（島皮質）の3か所に分かれて誘発されることが最近示された。しかしながら、ラットにおける膜電位感受性色素を用いた光学計測では、S2とICの応答はマウスのカルシウムイメージングのように別々では無く、その境界領域から一塊として生じることが報告されており、マウスで応答性が異なる理由は明らかとなっていない。このように、マウスにおける歯根膜感覚情報処理については不明な点が多い。そこで本研究では、マウスの歯根膜感覚の情報を処理する部位を明らかにする目的で、フラビン蛍光に着目した光学計測法を行い、大脳皮質の応答性を検討した。本実験で行う光学計測法を用いた検討にはC57BL6/Jマウスを用いる。ウレタンを用いて全身麻酔を行い、上下左右の臼歯歯根膜に刺激電極を刺入後、骨窓を形成し、中大脳動脈と嗅溝の交点を中心として、S1、S2、ICを含む領域の頭蓋骨に開窓を行った。開窓した左側大脳皮質に、臼歯歯根膜に電気刺激を与え、フラビン蛍光の光学計測を行い蛍光輝度の変化をCMOSカメラにて観察し、平均加算して得られる応答を抽出し、大脳皮質の応答性を検討した。その結果、フラビン蛍光による観察ではカルシウムイメージングとは異なり、2か所の応答（S1とS2/IOR）、の応答パターンを示す個体が多く認められた。このことから、マウスでも臼歯歯根膜からの感覚情報はS2/IORに投射され処理されることが示唆された。カルシウムイメージングにおける観察結果と異なるパターンで応答が認められる原因として、刺激方法が異なること、観察手法によって捉えている現象が異なっていることなどの可能性が考えられた。

マウスの歯干片に Repeatedly stimulate を行ったカルシウム応 Answer では, one-time body-sexy 覚野(S1), two times The physical sex appeal (S2) and IC (island cortex) の3か分かれてinducing発されることがrecently showed された. Measuring the membrane potential sensitive pigments of しかしながら and ラットにおける using いた optical measurementでは、S2とICの応达はマウスのカルシウムイメージングのように比々では无く、その realm realm から一piece として生じることがreportされており、マウスで応 Answer sex がdifferent なるreason は明らかとなっていない.このように, マウスにおける歯root film feeling覚Information processing についてはUnknown な点が多い.そこでThis study is about では, マウスの歭歭歯sensitivity覚のinformationをtreatmentするPartを明らかにするobjectで, フラビン蛍光に目したoptical measurement methodを行い,大脳 cortexの応Answerabilityを検した. This application is based on the optical measurement method used in C57BL6/JM. The whole body is anesthetized using the ウレタンを, and the upper, lower, left and right mortars are used to stimulate the root membrane. After the stimulating electrode is inserted, the bone is formed. The intersection point of the middle and large arteries and the olfactory groove is the center of the skull, S1, S2, and IC are included in the skull. Open the left side of the epidermis cortex, mortar root membrane, electrostimulation, and optical measurement of light and brightness. Chemical CMOS detection, average addition calculation, extraction, and large-scale cortical detection.そのRESULT, フラビン蛍光による観看ではカルシウムイメージングとはdifferentなり, 2かSo no answer (S1とS2/IOR), no answer no more than one individual.このことから、マウスでもmortar 歯歯根片からの情覚information はS2/IORにprojection されprocessing されることが出款唆された.カルシウムイメージングにおける禳Observation result とdifferent なるパターンで応answer められるreason として, stimulation method The method is different, the method is different, the technique is used to catch the phenomenon, the phenomenon is different, the possibility is tested.