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新規顎裂部閉鎖治療を目指した乳歯歯髄由来間葉系幹細胞集団の同定と骨再生機構の解明

乳牙牙髓间充质干细胞群的鉴定及新型裂隙闭合治疗的骨再生机制的阐明

基本信息

批准号：
22K21062
负责人：
力武航大
金额：
$ 1.83万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-08-31 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K21062/
关键词：
再生医療幹細胞

项目摘要

研究実施計画に従い、ヒト乳歯歯髄由来間葉系幹細胞（SHED）を FACS AriaⅡを使用し、フローサイトメトリーを行うことで、CD146の発現率を解析した。その結果、ヘテロなSHED細胞集団のうち、約70.9%がCD146を発現していた。同様にFACS AriaⅡを使用してセルソーティングを行い、SHED、CD146+SHED、CD146-SHEDを単離し培養した。培養したこれら3種の細胞の骨分化能について比較、検討した。骨分化誘導を行い、28日後にAlizarin Red染色と吸光度測定を行った。また、骨分化誘導0、21、28日目骨形成関連マーカー（ALP、BMP-2、OCN）の発現について、定量PCRを用いた遺伝子解析を行った。Alizarin Red染色および吸光度測定の結果は、CD146+SHED、SHED、CD146-SHEDの順に濃く染色され、吸光度測定においてもCD146+SHEDがSHED、CD146-SHEDよりも有意に高い値を示した。骨分化誘導0日目はALP、BMP-2、OCNの発現について3群間で有意差を認めなかったが、骨分化誘導21、28日目では、ALP、BMP-2、OCNのいずれにおいても、CD146+SHEDにおいて有意に高い遺伝子発現を認めた。これらの研究結果はCD146陽性SHEDが骨再生に有用であることを示唆した。以上の研究結果をまとめ、2023年2月17日に論文としてInternational Journal　of　Molecular Sciences.17;24(4):4048.（査読有）に掲載された。

In the study, the expression of CD146 was analyzed by FACS Aria II from mesenchymal stem cells (SHED). As a result, about 70.9% of SHED cell populations were found to be CD146 positive. The same FACS Aria II was used to isolate the cells, SHED, CD146 +SHED, and CD146-SHED. The bone differentiation ability of three kinds of cells in culture can be compared and examined. Alizarin Red staining and absorbance determination were performed after 28 days of bone differentiation. Bone differentiation was induced on days 0, 21, and 28, and bone formation was related to the development of ALP, BMP-2, and OCN. Alizarin Red staining and absorbance measurements showed that CD146+SHED, SHED, CD146-SHED were significantly higher than CD146+SHED and CD146-SHED. Bone differentiation induction 0 days ago, ALP, BMP-2, OCN were detected in 3 groups, bone differentiation induction 21 days ago, BMP-2, OCN were detected in 3 groups, CD146 +SHED were detected in 3 groups. The results of this study indicate that CD146 positive SHED is useful for bone regeneration. International Journal of Molecular Sciences. 17;24(4):4048. (See below).