新規顎裂部閉鎖治療を目指した乳歯歯髄由来間葉系幹細胞集団の同定と骨再生機構の解明

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研究実施計画に従い、ヒト乳歯歯髄由来間葉系幹細胞（SHED）を FACS AriaⅡを使用し、フローサイトメトリーを行うことで、CD146の発現率を解析した。その結果、ヘテロなSHED細胞集団のうち、約70.9%がCD146を発現していた。同様にFACS AriaⅡを使用してセルソーティングを行い、SHED、CD146+SHED、CD146-SHEDを単離し培養した。培養したこれら3種の細胞の骨分化能について比較、検討した。骨分化誘導を行い、28日後にAlizarin Red染色と吸光度測定を行った。また、骨分化誘導0、21、28日目骨形成関連マーカー（ALP、BMP-2、OCN）の発現について、定量PCRを用いた遺伝子解析を行った。Alizarin Red染色および吸光度測定の結果は、CD146+SHED、SHED、CD146-SHEDの順に濃く染色され、吸光度測定においてもCD146+SHEDがSHED、CD146-SHEDよりも有意に高い値を示した。骨分化誘導0日目はALP、BMP-2、OCNの発現について3群間で有意差を認めなかったが、骨分化誘導21、28日目では、ALP、BMP-2、OCNのいずれにおいても、CD146+SHEDにおいて有意に高い遺伝子発現を認めた。これらの研究結果はCD146陽性SHEDが骨再生に有用であることを示唆した。以上の研究結果をまとめ、2023年2月17日に論文としてInternational Journal　of　Molecular Sciences.17;24(4):4048.（査読有）に掲載された。