权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

アクチンストレスファイバーの力学応答に伴う構造変化の高速AFM観察

高速 AFM 观察与肌动蛋白应力纤维机械响应相关的结构变化

基本信息

批准号：
24870011
负责人：
中山隆宏
金额：
$ 1.5万
依托单位：
Kanazawa University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
财政年份：
2012
资助国家：
日本
起止时间：
2012-08-31 至 2014-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-24870011/
关键词：
原子間力顕微鏡

项目摘要

高速原子間力顕微鏡（高速AFM）で培養動物細胞のイメージングを行う準備段階として下記の成果を得た。①高解像度のイメージングのためのAFMカンチレバー探針の作製方法の確立：AFMイメージングで高解像画像を得るために先端曲率の小さい探針を必要とし、走査電子顕微鏡を用いた電子ビーム堆積法（EBD）を用いてきた。本研究では、先ず探針の作製条件を確立すべく、EBDにおける走査電子顕微鏡の条件（加速電圧、スポット径、作動距離等）の最適条件を見出した。このようにして作製したアモルファスカーボン製の探針を、さらにより先端曲率を小さくしたり、探針再生のための探針完全除去するため、切削手法を試行錯誤した結果、UV・オゾンを用いた方法により、達成することができた。②培養動物細胞表面のイメージング：高速AFMに用いる特製の小さなステージ上で培養動物細胞を培養する方法を確立し、細胞表面構造の動態や細胞骨格様の構造を観察することに成功した。本研究で必要とする外力の導入方法として、イメージング中に一時的にカンチレバーで加える力を強くすることによって細胞に障害を加えることに成功した（障害が回復する過程も観察できたことから生細胞であることも確認できた）。今後は細胞膜を除去した細胞を用いて実験を行うことにより、アクチン細胞骨格に加わる傷害の修復過程の観察をより厳密に制御（アクチン細胞骨格修復に関連するタンパク質の添加）して、アクチン細胞骨格修復過程のタンパク質のダイナミクスを観察する。

High-speed atomic force micrometer (high-speed AFM) high-speed atomic force micrometer (high-speed atomic force micrometer) high-speed atomic force micrometer (high-speed atomic force micrometer) high-speed atomic force micrometer (high-speed atomic force micrometer) high-speed atomic force micrometer (high-speed atomic force micrometer). 1. High resolution system, high resolution, high resolution In this study, we first explored the operating conditions to ensure that the operating conditions were established, and that the EBD operating conditions (accelerator, tracking path, operating distance isolation, etc.) were the most effective conditions. In this paper, we use the method to detect the curvature of the end, the curvature of the 2. The cell surface of high-speed AFM was confirmed by the method of cell culture and cell culture. The cell surface was made dynamic, the cell was made, and the cell was made successfully. In this study, it is necessary to use external forces to input the method, and in the middle of the study, it is necessary to make sure that the cell is damaged and that the failure is successful. In the future, the cell membrane will be removed and the cell will be repaired in the process of overhauling. In the future, the cell membrane will be removed, and the cell will be repaired.