HVEMを標的とした自己免疫疾患に対する新規治療法の開発

开发针对 HVEM 的自身免疫性疾病新疗法

• 批准号: 24890145
• 负责人: 佐古田 幸美
• 金额: $ 1.91万
• 依托单位: Yamaguchi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012-08-31 至 2014-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-24890145/
• 关键词: 免疫; 共シグナル

Hypoxia inducible factor (HIF)は低酸素誘導性の転写因子で、低酸素状態における血管新生や造血の促進、慢性炎症や癌の進展に関与することが知られているが、リンパ球による免疫応答におけるHIFの役割については解明されていない。最近の我々の研究により、免疫細胞に幅広く発現する共シグナル分子のHVEM(Herpes virus entry mediator)がHIFの機能亢進に関与することが判明した。一方でHIFは炎症性のTh17(T helper type 17)細胞の分化・発展に関与することが示されている。そこで本研究では、HVEMがHIFを介してTh17細胞の誘導を促進するという仮説を立て、これを動物モデルを用いて検証する。平成24年度はまずin vitroでHVEMシグナル刺激によってリンパ球がTh17関連サイトカインを産生するかを検討した。マウスから分離したTリンパ球を抗CD3抗体とコントロールIgGあるいはHVEMシグナル刺激抗体(HM3.30)で刺激したところ、コントロール群と比較しHM3.30投与群はIL-17aを含むTh17関連サイトカインの産生が有意に上昇していた。次にHM3.30によるin vivoの効果を検討した。マウスにコントロールIgGまたはHM3.30を200ug腹腔内投与し4日後に脾臓を摘出した。Th17細胞を同定するため脾細胞をPMAとionomycinにて4時間刺激し、flow cytometryにてIL-17aサイトカインの産生を解析すると、コントロール群に比べHM3.30投与群で有意にIL-17a産生細胞の割合が増加していた。現在、再現性を確認すると共にTH17誘導性の疾患であるEAE（experimental　autoimmune encephalomyelitis）におけるHM3.30の役割について検討中である。

Hypoxia inducible factor (HIF) is associated with hypoxia-inducible factors, angiogenesis, hematopoiesis promotion, chronic inflammation, and cancer progression. Recent studies have shown that HVEM (Herpes virus entry mediator) is involved in the hyperfunction of HIF. HIF is associated with the differentiation and development of inflammatory Th17 (T helper type 17) cells. In this study, HVEM was used to mediate the induction of Th17 cells. In 2014, the HVEM was released in the vitro. Anti-CD3 antibody, anti-CD3 IgG, anti-HVEM stimulating antibody (HM3.30), anti-CD3 antibody, anti-CD3 IgG, anti-HVEM stimulating antibody (HM3.30), anti-CD3 antibody, anti-CD3 IgG, anti-HVEM stimulating antibody (HM3.30), anti-CD3 antibody, anti-CD3 antibody, anti-CD3 IgG, anti-HVEM stimulating antibody, anti-CD3 IgG, anti-CD3 antibody, anti-CD3 antibody, HM3.30 in vivo and results are discussed. IgG was injected intraperitoneally at HM3.30 and extracted 4 days later. Th17 cells were stimulated with PMA and ionomycin for 4 hours, and IL-17a production was analyzed by flow cytometry. IL-17a-producing cells were intentionally increased compared with HM3.30 cells. Now, reproducibility is confirmed. Total TH 17 induced disease is confirmed. EAE (experimental autoimmune encephalomyelitis) is confirmed. HM3.30 is confirmed.