小腸幹細胞の同定とその維持・分化に関わるRNA結合蛋白Musashi-1の解析

参与小肠干细胞鉴定及其维持和分化的RNA结合蛋白Musashi-1分析

• 批准号: 15590643
• 负责人: 澤田 光孝
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15590643/
• 关键词: Musashi-1; 小腸幹細胞; Hes-1; パネート細胞

小腸の幹細胞については、未だ不明な点が多い。RNA結合蛋白Musashi-1、転写因子Hes1は、中枢神経系幹細胞の維持や分化に重要な働きをしているが、小腸にも発現している。本研究では、小腸の幹細胞維持、再生、分化におけるMusashi-1、Hes1の役割と、Hes1 K/Oマウスについて検討した。(結果)(1)RT-PCRではMusashi-1はマウスの大脳、胃、小腸、大腸、肝、一部の小腸細胞株に、Hes1は、これらすべての臓器、細胞に発現していた。(2)免疫染色では、生後1日目マウスではいずれも幹細胞が存在する絨毛間の細胞に発現していた。7、14日目では、ともにパネート細胞(P細胞)周囲の細胞に発現が見られた。さらに21日目には、P細胞間に存在するcrypt base columnar cell(陰窩底部円柱上皮細胞、CBC)とP細胞直上のいわゆる小腸幹細胞は、Ki-67が強陽性であった。この時点では、Musashi-1、Hes1は小腸幹細胞領域とCBCにも共存していた。しかしその他の上皮細胞には認められなかった。またHes1は、Musashi-1と比べるとより絨毛側の細胞にも存在していた。(3)一方、Hes-1 K/Oマウスの出生直後のRT-PCR,免疫染色では、正常マウスに比較して、小腸内分泌細胞の転写因子Math1の発現が著明に増強していた。さらに、通常生後7〜14日目頃から見られるP細胞が生直後から出現しており、cryptidin1、4、5の発現も早期から見られた。一方Musashi-1の発現は軽度低下していた。(考察)従来、小腸上皮幹細胞はP細胞の直上にあって、上下2方向に分化すると考えられていた。しかし今回の結果より(1)これら陰窩のMusashi-1、1Hes1陽性細胞がすべて小腸の幹細胞として機能し、そこからP細胞や上皮細胞に分化する可能性、あるいは(2)P細胞直上の幹細胞が絨毛の幹細胞であり、CBCがP細胞の幹細胞である可能性が示唆された。またHes1 K/Oマウスで、内分泌細胞やP細胞への分化が早期から見られたことから、Hes1は小腸上皮の分化を抑制しているものと考えられる。

There are many points in the cell, but there are many points in the unknown. The RNA binding protein Musashi-1, the writing factor Hes1, and the central nervous system cell cycle maintain the important differentiation cycle, and the small cell cycle can be detected. In this study, cell maintenance, regeneration and differentiation were carried out. Musashi-1, Hes1 and Hes1 K were used to maintain, regenerate and differentiate. (results) (1) RT-PCR, stomach, small trochanter, big liver, one small cell line, Hes1 cell line, and small cell cycle were detected by RT-PCR. (2) Immunostaining was used to detect the presence of fetal hair cells on the 1st day after birth. On the 7th and 14th, there was a slight increase in the number of cells (P cells) every week. On the 21st day, there is a crypt base columnar cell (column epithelium cell, CBC), and there is a small cell, and a Ki-67 cell. In recent years, Musashi-1, Hes1, and CBC coexist in the cellular domain. I don't know. I don't know what he's got. "Hes1", "Musashi-1" is better than "hair", "hair", "cell" exists. (3) one side, Hes-1 Krammer Oliver was RT-PCR directly after birth, immunostaining was performed, normal mice were immunized, and small endocrine cytokines were expressed in Math1 cells. After 7-14 days of life, it is common to have an early pregnancy, cryptidin1, 4, 5 years after birth, and the early stage of pregnancy. One side of Musashi-1 shows that the degree of illness is low. (investigation) Lai, Lai The results were as follows: (1) the results of this study were as follows: (1) the possibility of differentiation of epithelial cells, the possibility of differentiation of epithelial cells, the possibility of cell differentiation, cell cycle, cell cycle, cell cycle In the early stage of differentiation, the inhibition of the differentiation of small epithelium, the inhibition of Hes1 Kapot, the early differentiation of endocrine cells, the inhibition of epithelial differentiation, the inhibition of small epithelial differentiation, the inhibition of small epithelial differentiation, the inhibition of small epithelial differentiation, the inhibition of small epithelial differentiation, the inhibition of small epithelial differentiation.

项目成果

Fukuzawa, H., Sawada, M., et al.: "Identification of GM-CSF in Paneth cells using single-cell RT-PCR"Biochemical and Biophysical Research Communications. 312. 897-902 (2003)

Fukuzawa, H.、Sawada, M. 等人：“使用单细胞 RT-PCR 鉴定潘氏细胞中的 GM-CSF”生物化学和生物物理研究通讯。