絶対寄生および半活物寄生に対するCa2+流動の制御機構と生理的意義の解明

专性和半活体寄生中Ca2+通量的控制机制和生理意义的阐明

• 批准号: 22H02349
• 负责人: 八丈野 孝
• 金额: $ 11.32万
• 依托单位: Ehime University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22H02349/
• 关键词: オオムギうどんこ病菌; カルシウムイオン; 絶対寄生; 半活物寄生; mlo

オオムギうどんこ病菌のレースに依存せずに抵抗性を発揮するmlo変異体が抵抗性遺伝資源として長らく利用されてきたが、生育阻害などのデメリットがあるため、不明である抵抗性付与メカニズムを詳細に解明することが求められている。本研究においてMLOタンパク質がカルシウムイオンの流入に強く関与することが明らかになっており、また、シロイヌナズナ花粉管研究によりMLOオルソログがカルシウムイオンチャネルである可能性が示唆された（Gao et al., 2022）。当初は、CNGCカルシウムチャネルとMLOが相互作用することで制御すると想定されていたが（Meng et al., 2020）、MLO相互作用タンパク質の網羅的解析からはそれを支持するデータは得られていない。したがって、オオムギにおいてもMLO自身がカルシウムイオンチャネルとして機能すると仮説を立て、詳細な解析を行うために必須となるカルシウムイオンセンサーを発現するmlo変異体をCRISPR/Cas9システムを利用して作製した（Koide et al., 2023）。これまでは一過的発現系を利用した実験において、カルシウムセンサーが導入されたmlo表皮細胞でのカルシウムイオンの流入を解析していたが、安定形質転換体であるため多細胞を同時にリアルタイム解析できるようになり、流入パターンを統計学的に解析できるようになった。さらに、形質転換が容易な品種であるGolden Promiseで作製しているため、MLOの機能相補解析を行うことが可能となった。また、プロテーム解析より、カルシウムイオン流入の制御に関与すると考えられる新たなMLO相互作用タンパク質を見出した。

オオムギうどんこ pathogenic bacteria のレースにdependence せずにresistant を発水するmlo変variantがresistant 伝RESOURCES として长らくutilizationされてきたが, Fertility Inhibition などのデメリットがあるため, Unknown であるarrive Resistance granting details are explained in detail. This study is based on the quality of MLO MLO Into the strong seclusion and することが明らかになっており, また, シロイヌナズナpollen tube researchによりMLOオルソログがカルGao et al., 2022). At the beginning, the CNGC control system was designed to interact with the MLO system (Meng et al., 2020), the analysis of the MLO interaction タンパクqualityの网灋らはそれをsupport するデータは得られていない. MLO's own MLOチャネルとして Function すると仮说を立て、Detailed analysis を行うためにIt is necessary to use the となるカルシウムイオンセンサーを発开するmlo変variantをCRISPR/Cas9システムをutilize the してした（Koide et al., 2023).これまではOnce the appearance of the system is used, した実験において, カルシウムセンサーが Import されたmlo Epidermal cells でのカルシウムイオンの inflow を Analysis していたが、Stable morphological change body であるためmulticellular をsimultaneous にリアルタイムanalysisできるようになり, パターンをstatistics of にanalytics できるようになった.さらに、morphological change is easyがvarietyであるGolden Promiseでproductionしているため、MLOのfunctional complementary analysisを行うことがpossibleとなった.また、プロテームANALYSISより、カルシウムイオン inflow control gate andすると卡えられる新たなMLO interaction タンパク性を见出した.

项目成果

オオムギうどんこ病菌侵入細胞におけるプラスチド崩壊メカニズムの解析

大麦白粉病菌侵染细胞质体塌陷机制分析

• 发表时间: 2022
• 作者: 在間玄香;井上博;久野裕;松島良;小林括平;山岡直人;中神弘史;八丈野孝
• 通讯作者: 八丈野孝

オオムギうどんこ病菌エフェクターAPEC1の標的タンパク質であるグリコール酸オキシダーゼの機能解析

大麦白粉病效应子APEC1靶蛋白乙醇酸氧化酶的功能分析

• 发表时间: 2022
• 作者: 小出陽菜;片山貴博;井上智絵;香口智宏;小林括平;山岡直人;西内巧;中神弘史;八丈野孝
• 通讯作者: 八丈野孝

エンドウうどんこ病菌に寄生する菌寄生菌Simplicillium sp.の解析

寄生豌豆白粉病真菌的真菌寄生真菌Simplicillium sp.的分析。

• 发表时间: 2022
• 作者: 岡久真也;小川翔也;清水茜;小林括平;吉田健太郎;八丈野孝;小出陽菜・片山貴博・井上智絵・香口智宏・小林括平・山岡直人・西内巧・中神弘史・八丈野孝;小出陽菜・和根崎洸・片山貴博・井上智絵・香口智宏・小林括平・西内巧・中神弘史・八丈野孝;福井奈緒・小林括平・八丈野孝
• 通讯作者: 福井奈緒・小林括平・八丈野孝

宿主ペルオキシソーム局在型オオムギうどんこ病菌エフェクターAPEC1の解析

宿主过氧化物酶体定位大麦白粉病效应子 APEC1 的分析

• 发表时间: 2022
• 作者: 八丈野孝;小出陽菜;和根崎洸;片山貴博;井上智絵;香口智宏;小林括平;西内巧;中神弘史;山岡直人
• 通讯作者: 山岡直人

レーザー熱膨張式マイクロインジェクション技術を利用したHR細胞死のシングルセル解析

利用激光热膨胀显微注射技术对 HR 细胞死亡进行单细胞分析

• 发表时间: 2022
• 作者: 岡久真也;小川翔也;清水茜;小林括平;吉田健太郎;八丈野孝
• 通讯作者: 八丈野孝