Molecular mechanisms of ribosome degradation in host defense of insect cells

昆虫细胞宿主防御中核糖体降解的分子机制

• 批准号: 22H02358
• 负责人: 池田 素子
• 金额: $ 11.23万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22H02358/
• 关键词: 核多角体病ウイルス; 全タンパク質合成停止; リボソーム分解; カイコ; 抗ウイルス応答; リボソームRNA分解

Autographa californica 核多角体病ウイルス（AcMNPV）のP143と相互作用するカイコ細胞因子をアフィニティー精製カラムにより探索するため，AcP143最小領域の大量発現を行った．AcP143最小領域の配列をバキュロウイルスタンパク質発現系であるバクミド（AcBac）に挿入し組換えバクミドを作成した．AcP143の最小領域と相同なカイコNPV P143（BmP143）配列についても組換えバクミドを作成した．得られたそれぞれの組換えバクミドDNAをSf9細胞にトランスフェクション法で導入することによって，AcP143最小領域およびそのBmP143相同体の発現を確認することができた．トランスフェクションした細胞培養液から組換えウイルスが得られたので，組換えウイルスをSf9細胞に感染させることでそれぞれの発現タンパク質を大量に回収し，回収したタンパク質を用いてアフィニティー精製カラムの作成を進める．これまでに，AcP143最小領域の中で6つのアミノ酸（H514，H528，V556，S564，F577，A599）がrRNA分解に関与し，Q325はAcP143最小領域の構造維持などに機能していることを示した．これらのアミノ酸が異常タンパク質の形成に関わり，そのストレス応答としてrRNA分解が誘導されている可能性がある．そこで，BmP143最小領域のQ326，V529，T600（AcP143のQ325，H528，A599に相当）の各アミノ酸を置換し，異常構造をとらせることによってrRNA分解が誘導されるかを調査した．その結果，今回行ったBmP143最小領域の１アミノ酸置換だけではrRNAの分解は誘導されなかった．

Autographa californica nuclear polyhedrosis (AcMNPV) P143 interaction AcP143 minimum domain large number of occurrence is carried out. AcP143 minimum domain of the array is divided into three parts: the quality of the occurrence system (AcBac) is divided into three parts: the minimum domain of AcP143 and the same type of NPV P143 (BmP143) is divided into three parts: the minimum domain of AcP143 is divided into three parts: the minimum domain of AcP143 and the minimum domain of AcP143. With the introduction of the prepared recombinant plasmid DNA into Sf9 cells using the Transamerica method, the discovery of the smallest domain of AcP143 and the BmP143 isoform was confirmed. The cell culture medium is composed of the following components: cell culture medium, cell culture medium and cell culture medium. In this regard, AcP143 minimal domain in the middle of the six acids (H514, H528, V556, S564, F577, A599) is related to the decomposition of rRNA, Q325 AcP143 minimal domain structure to maintain the function of this. The possibility of inducing the decomposition of rRNA is discussed. In addition, Q326, V529 and T600 (corresponding to Q325, H528 and A599 of AcP143) in the smallest domain of BmP143 were replaced by different acids, and abnormal structures were investigated. BmP143 is the smallest domain in the world.

项目成果

AcMNPV感染カイコ細胞におけるリボソームRNAの切断部位の同定

AcMNPV 感染的蚕细胞中核糖体 RNA 裂解位点的鉴定

• 发表时间: 2023
• 作者: 原屋正龍;池田素子;浜島りな
• 通讯作者: 浜島りな

カイコ細胞におけるrRNA 分解誘導に関与する核多角体病ウイルスP143 タンパク質の立体構造予測

核型多角体病毒P143蛋白参与蚕细胞rRNA降解诱导的三维结构预测

• 发表时间: 2023
• 作者: 浜島りな;原屋正龍;池田素子
• 通讯作者: 池田素子

核多角体病ウイルスIE-1がカイコ細胞iap1遺伝子の発現に及ぼす影響の調査

核型多角体病毒IE-1对家蚕细胞iap1基因表达影响的研究

• 发表时间: 2023
• 作者: 渡邊希香;山溝千尋;横山英子;石橋和大;瀬尾茂美;小杉海斗・高木圭子・藤井告・伴野豊・金児雄;大森裕介・小杉海斗・藤井告・伴野豊・金児雄;木矢 剛智・子浦 由大・國生 龍平・金子 佳樹・岩見 雅史・木矢 星歌;金子 佳樹・國生 龍平・岩見 雅史・木矢 剛智;河合祐作・浜島りな・小林迪弘・池田素子
• 通讯作者: 河合祐作・浜島りな・小林迪弘・池田素子

サクサン培養細胞における6 種の核多角体病ウイルスの感染性調査

六种核型多角体病毒在 Sakusan 培养细胞中的感染性研究

• 发表时间: 2023
• 作者: 礒部 詩保;浜島 りな;小林 淳;池田 素子
• 通讯作者: 池田 素子

NPV のIE-1 がカイコ細胞iap1 遺伝子のmRNA 量に及ぼす影響の調査

NPV IE-1对家蚕细胞iap1基因mRNA水平影响的研究

• 发表时间: 2023
• 作者: 河合祐作;浜島りな;池田素子
• 通讯作者: 池田素子