Species composition, toxicity and distribution of azaspiracid-producing dinoflagellates in Japanese coastal waters

本研究は日本周辺海域に分布するアンフィドマ科渦鞭毛藻の種組成，毒組成，そして有毒個体群の分布を明らかにすることで，アザスピロ酸生産種の検出基盤を構築することを目的としている。2022年度はアンフィドマ科渦鞭毛藻の試料採集と培養株作成を開始し，これに現在までに作成して研究室で維持している培養株を加え，光顕と走査電顕による形態観察，分子系統解析，毒分析を実施した。広島湾，相模湾，浜名湖，東京湾等で試料を採集したほか，北海道東部，仙台湾，上五島等から海水試料を入手してアンフィドマ科渦鞭毛藻の細胞を探索した。作成した培養株のLSU rDNAとITS領域に基づく分子系統解析により，Azadinium dalianense，A. dexteroporum，A. poporum，A. zhuanumの出現を確認した。これらのうちA. dalianenseとA. dexteroporumは日本で初めての出現確認となる。今年度作成した培養株の中で，有毒種A. poporumについては種内系統群BとC1が確認されている。これらのアザスピロ酸分析では，系統群C1からはAZA-2が，系統群Bからはそれ以外の類縁体も検出された。また，日本産Azadinium株の系統解析と走査電顕観察を進め，類縁種とは頂孔板付近の構造（腹孔の位置と前頂孔板の大きさ）が異なることなどから未記載種であることを確認し，新種としての記載論文を投稿した。日本周辺に出現するアザスピロ酸生産種の定量を目的としたqPCRについては，これまでにアザスピロ酸の生産が確認されているA. poporumとA. spinosumの培養株を用いて細胞数を定量するための予備実験を進めている。

本研究は日本周辺海域に分布するアンフィドマ科渦鞭毛藻の種組成，毒組成，そして有毒個体群の分布を明らかにすることで，アザスピロ酸生産種の検出基盤を構築することを目的としている。2022年度はアンフィドマ科渦鞭毛藻の試料採集と培養株作成を開始し，これに現在までに作成して研究室で維持している培養株を加え，光顕と走査電顕による形態観察，分子系統解析，毒分析を実施した。広島湾，相模湾，浜名湖，東京湾等で試料を採集したほか，北海道東部，仙台湾，上五島等から海水試料を入手してアンフィドマ科渦鞭毛藻の細胞を探索した。作成した培養株のLSU rDNAとITS領域に基づく分子系統解析により，Azadinium dalianense，A. dexteroporum，A. poporum，A. zhuanumの出現を確認した。これらのうちA. dalianenseとA. dexteroporumは日本で初めての出現確認となる。今年度作成した培養株の中で，有毒種A. poporumについては種内系統群BとC1が確認されている。これらのアザスピロ酸分析では，系統群C1からはAZA-2が，系統群Bからはそれ以外の類縁体も検出された。また，日本産Azadinium株の系統解析と走査電顕観察を進め，類縁種とは頂孔板付近の構造（腹孔の位置と前頂孔板の大きさ）が異なることなどから未記載種であることを確認し，新種としての記載論文を投稿した。日本周辺に出現するアザスピロ酸生産種の定量を目的としたqPCRについては，これまでにアザスピロ酸の生産が確認されているA. poporumとA. spinosumの培養株を用いて細胞数を定量するための予備実験を進めている。