Construction of animal foamy virus vector and development of enzootic bovine leukosis vaccine

动物泡沫病毒载体的构建及牛地方性白血病疫苗的研制

• 批准号: 22H02500
• 负责人: 目堅 博久
• 金额: $ 10.98万
• 依托单位: University of Miyazaki
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2026-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22H02500/
• 关键词: 牛伝染性リンパ腫; BLV; 牛フォーミーウイルス; ワクチン; マウス; フォーミーウイルス; レトロウイルスベクター; 牛

牛伝染性リンパ腫は、牛伝染性リンパ腫ウイルス(BLV)の感染を原因とする牛の慢性致死性感染症である。畜産業の経済的被害が大きく、感染対策が難しいことから、ワクチンの実現が望まれている。1980および90年代の論文では、不活化ワクチンで2度免疫した後の中和抗体価が高い時期であれば、BLVの感染を阻止できることが報告されている。そこで本研究は、牛のフォーミーウイルスにBLV抗原を組み込むことで、中和抗体価を終生高い値で維持できるBLVワクチンの開発を目指す。本研究は、研究項目①.組換え牛フォーミーウイルスの作成、研究項目②.BLVとの組換えウイルス作成と接種プロトコルの最適化、研究項目③.牛への組換えウイルス接種で構成される。1年目である2022年度は、研究項目①と②を実施した。①については、組換えウイルスの大臣確認申請を終え、現在、組換えウイルスの作成に取り組んでいる。②については、牛フォーミーウイルス野外株を使い、マウスを使った感染実験系を構築している。マウスに牛フォーミーウイルスの感染培養細胞の上清や感染細胞自体を接種する手法を検討した結果、長期間培養した培養細胞上清を接種した場合でのみ、一部のマウスの脾臓で感染が成立することがわかった(感染28日後、PCR法による確認)。現在、感染した脾臓からの感染性ウイルスの回収とウエスタンブロット法による抗体保有状況の検討を行っている。なお、3つの遺伝子型(欧州型、米国-アジア型、第III型)については、感染性に大きな違いは認められなかった。

Cattle 伝 dyeing リ ン パ swollen は, cattle 伝 dyeing リ ン パ swollen ウ イ ル ス (BLV) for の を infections と す る cattle の chronic fatal adapting just-in-time inventory で あ る. Murder of livestock industry の 経 済 が big き く, infection policy が seaborne し い こ と か ら, ワ ク チ ン の be now looking が ま れ て い る. 1980 お よ び の papers in the 90 s で は, no activation ワ ク チ ン で 2 degrees immune し た の after neutralizing antibody 価 が high い で あ れ ば, BLV の を prevent infection で き る こ と が report さ れ て い る. そ こ で は this study, cattle の フ ォ ー ミ ー ウ イ ル ス に BLV group antigen を み 込 む こ と で, neutralizing antibody 価 を lifelong high い numerical で maintain で き る BLV ワ ク チ ン の open 発 を refers す. は this study, the research project (1). Set in え cattle フ ォ ー ミ ー ウ イ ル ス の is made, the research project (2). The BLV と の group in え ウ イ ル ス made と vaccination プ ロ ト コ ル の optimization, research projects (3). Bovine へ sets are exchanged for えウ えウ ス ス ス inoculated で to form される. 1 year である2022 である, research project ①と②を implemented た. 1) に つ い て は, group in え ウ イ ル ス の を eventually え application minister acknowledged, now, set in え ウ イ ル ス の made に group take り ん で い る. (2) に つ い て は, cattle フ ォ ー ミ ー ウ イ ル ス wild strains を い, マ ウ ス を make っ た infection be 験 department を build し て い る. マ ウ ス に cattle フ ォ ー ミ ー ウ イ ル ス の infection culture cell の supernatant や infected cells autograft を vaccination す る gimmick を beg し 検 た results, long-term training し た qing を on cultured cells inoculated し た occasions で の み, a の マ ウ ス の splenic で infection が established す る こ と が わ か っ た (infection 28, PCR method に よ る confirmation). Now, infection し た splenic か ら の infectious ウ イ ル ス の back 収 と ウ エ ス タ ン ブ ロ ッ ト method に よ る antibodies keep status の 検 line for を っ て い る. な お, 3 つ の heritage 伝 subtypes (Europe, the U.S. - ア ジ ア type, type III) に つ い て は, infectious に き な violations い は recognize め ら れ な か っ た.