原虫感染マダニにおける臓器特異的ビテロジェニンの機能解明

阐明原生动物感染蜱中器官特异性卵黄蛋白原的功能

• 批准号: 22H02512
• 负责人: 白藤 梨可
• 金额: $ 11.23万
• 依托单位: Obihiro University of Agriculture and Veterinary Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22H02512/
• 关键词: マダニ; 卵黄タンパク質前駆体; バベシア; 脂肪体; 卵巣; 中腸; 体液; 原虫伝播

（１）脂肪体・卵巣特異的Vg-2遺伝子の発現を抑制した雌ダニに、バベシア原虫感染牛赤血球を吸血させた。Vg-2遺伝子発現抑制群の雌ダニおよび対照群の雌ダニより個別に体液を採取し、バベシアDNAを定量的に解析したところ、対照群に比べ、Vg-2遺伝子発現抑制雌ダニの体液中のバベシアDNAレベルが有意に低下したことを見出した。このことは、脂肪体で合成され体液中に分泌されるVg-2が、体液中のバベシアの生存あるいは、バベシアの卵母細胞への侵入過程において、重要な役割を担うことを示唆する。（２）次いで、中腸特異的Vg-1のバベシア伝播における役割を解析する手法の確立を試みた。中腸上皮細胞にはDigestive cell（DC）とBasophilic cell（BC）があると言われているが、Vgを産生する細胞がDCとBCのいずれのタイプに該当するかは不明な点が多い。そこで、吸血後の雌ダニの中腸組織凍結切片を作製し、Vg-1特異的プローブを用いたin situハイブリダイゼーションを行った。その結果、吸血が完了してもなお、マダニ中腸上皮細胞内にVg-1 mRNAが検出され、Vg-1合成が行われる細胞が存在することをmRNAレベルで確認することができた。現在、Vg-1 mRNAが検出されたタイミングと細胞のタイプを特定するため、より詳細な観察を進めている。今後、これらの知見を、中腸上皮を構成する細胞の分離法確立に応用する。また、in situハイブリダイゼーションと免疫染色により中腸組織切片上でVg-1およびバベシアを同時に検出する手法を検討した。（３）既発表論文を参考に、in vitro培養系におけるバベシア有性生殖期虫体の誘導法を実施し、マダニへの人工吸血試験に応用するための準備を整えた。

(1) Inhibition of Vg-2 gene expression in adipocytes and oocytes. Vg-2 gene expression inhibition group female sex and female sex of the corresponding group were detected by quantitative analysis of DNA in individual body fluids. Vg-2 gene expression inhibition group female sex and female sex of the corresponding group were detected by quantitative analysis of DNA in body fluids. This is the first time that Vg-2 is secreted in body fluids, and the survival process of oocytes in body fluids is affected by the invasion process of oocytes. (2) The establishment of the method for analyzing the secondary and midgut specific Vg-1. Digestive cell (DC) and Basophilic cell (BC) in the midgut are produced by DC and BC. The frozen section of female intestine after blood sucking was prepared and Vg-1 was used in situ. As a result, Vg-1 mRNA was detected in intestinal epithelial cells, and Vg-1 synthesis was confirmed. Now, Vg-1 mRNA is detected in cells and cells. In the future, we will establish a method for the isolation of intestinal epithelial cells. The method of immunostaining for Vg-1 and Vg-1 on midgut tissue sections was discussed. (3) The preparation of the induction method of insect body in vitro culture system during sexual reproduction period was carried out and the artificial blood sucking test was carried out.

项目成果

Establishment of the Tick Biobank for the application to vector biology research and the development of tick control methods

建立蜱生物库，用于媒介生物学研究和蜱控制方法的开发

• 发表时间: 2022
• 作者: Kuniyori Maki;Sato Nariko;Yokoyama Naoaki;Kawazu Shin-ichiro;Xuan Xuenan;Suzuki Hiroshi;Fujisaki Kozo;Umemiya-Shirafuji Rika;白藤（梅宮）梨可;Rika Umemiya-Shirafuji
• 通讯作者: Rika Umemiya-Shirafuji

Establishment of the Tick Biobank and its application to vector biology research

蜱生物库的建立及其在媒介生物学研究中的应用

• 发表时间: 2022
• 作者: Rika Umemiya-Shirafuji;Nariko Sato;Naoaki Yokoyama;Xuenan Xuan;Hiroshi Suzuki
• 通讯作者: Hiroshi Suzuki

Babesia ovata感染フタトゲチマダニにおけるVg-1遺伝子の発現解析

卵形巴贝斯虫感染蜱中Vg-1基因的表达分析

• 发表时间: 2022
• 作者: 佐藤成子;鈴木宏志;白藤（梅宮）梨可
• 通讯作者: 白藤（梅宮）梨可

Expression profiles of vitellogenin-1 in Babesia ovata-infected Haemaphysalis longicornis ticks

卵黄巴贝斯虫感染的长角血蜱蜱中卵黄原蛋白-1 的表达谱

• 发表时间: 2022
• 作者: Nariko Sato;Hiroshi Suzuki;Rika Umemiya-Shirafuji
• 通讯作者: Rika Umemiya-Shirafuji

帯広畜産大学・原虫病研究センター

带广农业兽医大学/原虫病研究中心