Establishment of transcriptome engineering technique using PPR protein
PPR蛋白转录组工程技术的建立
基本信息
- 批准号:22H02611
- 负责人:
- 金额:$ 11.07万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
- 财政年份:2022
- 资助国家:日本
- 起止时间:2022-04-01 至 2025-03-31
- 项目状态:未结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
本課題では、本申請では我々が開発したPPR技術を利用したトランスクリプトーム編集技術のうち、未だ技術的に未成熟な「翻訳制御」に着目し、同技術の動物培養細胞、動物個体への適用を進めることによって医療応用にむけたProof-of-conceptを獲得するとともに、これまでの研究で示唆された未知の翻訳開始機構の解明に取り組むことを目的としている。本年度は、項目1. 「翻訳制御技術の動物個体への適用」について、同技術の動作安定性の検証や小型化を進めるとともに、AAVベクターへの搭載、培養細胞を用いたPPR分子の導入効率、翻訳活性化の効果を比較検証した。また、疾患関連遺伝子mRNA数種を標的として、当技術の医療適用可能性を検証した。項目2. 「新規の翻訳開始機構の解明」については、培養細胞を用いて、翻訳活性化効果を示すPPR分子を免疫沈降することで、細胞内での標的RNAや協同因子との結合を解析する実験系の確立を進めた。
在这个主题中,该应用程序的目的是专注于“翻译控制”,在使用我们开发的PPR技术的转录组编辑技术中,在技术上仍然不成熟,并通过促进该技术在动物文化细胞和个人中的应用来获得医学应用的概念证明,并解决了以前的研究中提出的转换机制。今年,我们已经验证了该技术的运行稳定性,并使该项目的规模较小。“将翻译控制技术应用于单个动物”,并比较并验证将其安装到AAV矢量中,并使用培养的细胞引入PPR分子,并进行翻译激活。此外,还针对几种类型的疾病相关基因mRNA来验证该技术的医学适用性。第2项。“了解翻译起始的新机制”,我们开始建立一个实验系统,通过对PPR分子的免疫沉淀,使用培养细胞表现出翻译激活作用,来分析细胞内靶RNA和合作因子的结合。
项目成果
期刊论文数量(2)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
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中村 崇裕其他文献
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