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B3転写因子による乾燥ストレス応答において機能するペプチド受容シグナルの制御機構

B3转录因子调控干旱胁迫反应的肽受体信号机制

基本信息

批准号：
22H02650
负责人：
高橋史憲
金额：
$ 10.82万
依托单位：
Tokyo University of Science
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22H02650/
关键词：
環境応答植物ホルモンタンパク質リン酸化転写調節

项目摘要

乾燥ストレス応答におけるペプチド－受容体の下流で機能する細胞内分子制御機構の解明を目的として、ABA合成酵素の発現を制御するB3転写因子に着目し、その機能解析を行った。GFP融合B3転写因子を野生型およびbam受容体変異体に導入し、乾燥ストレス条件下でのABA合成酵素の発現変動を解析した。その結果、B3-TF-GFP/野生型では、ABA合成酵素の発現がストレス条件下で高発現したのに対し、B3-TF-GFP/bam変異体では、ABA合成酵素の発現が抑制されていた。これらの結果は、B3-TFがBAM受容体の下流でABA合成酵素の発現を制御していることを示す。次に、共免疫沈降法によりB3-TF-GFPを野生型およびbam変異体から抽出した後、高分解能質量分析装置を用いて、乾燥ストレス条件におけるB3-TFのタンパク質修飾を解析した。その結果、B3-TFは乾燥ストレス依存的にリン酸化修飾を受けることを明らかにした。このリン酸化修飾部位は複数存在したため、リン酸化部位を含む周辺のアミノ酸配列を指標にモチーフ検索を行った結果、環境ストレス応答で機能する代表的なタンパク質リン酸化酵素のターゲット配列が含まれることを明らかにした。そこで複数のタンパク質リン酸化酵素群に着目し、野生型およびbam変異体を用いてGFP融合過剰発現植物体を作成した。またin vitorリン酸化アッセイを確立する目的で、GSTやMBPタグを融合させた各種タンパク質リン酸化酵素群およびB3-TFのコンストラクションを作成し、大腸菌内で培養し精製タンパク質の準備を進めた。これらの結果から、ペプチド－受容体の下流において、B3-TFがタンパク質リン酸化酵素による制御を受けてABA合成酵素の発現を制御しているシグナル伝達経路の存在を明らかにすることができた。

B3 gene expression factors are important for understanding the molecular control mechanism in cells and controlling the production of ABA synthase in the downstream function of dry cell receptors. Analysis of ABA synthase activity in wild-type and bam receptor variants introduced into GFP fusion B3 gene under dry conditions The results showed that B3-TF-GFP/wild-type had high expression of ABA synthase under different conditions, and B3-TF-GFP/bam variant had inhibition of ABA synthase expression. The results showed that B3-TF inhibited ABA synthase production downstream of BAM receptor. The B3-TF-GFP wild-type and bam variants were extracted and analyzed using a high-resolution energy analyzer and drying conditions. The B3-TF is a dry, acid-dependent substance. The acid modification site of the enzyme is complex, and the acid modification site contains the acid sequence of the enzyme. The acid sequence of the enzyme is complex, and the acid sequence of the enzyme contains the acid sequence of the enzyme. A number of different enzymes were used to produce plants fused with GFP. To establish the enzyme system, GST and MBP were fused, and the enzyme system of B3-TF was prepared. In Escherichia coli, the preparation of purified enzyme was carried out. The results show that the presence of B3-TF in the downstream of the receptor inhibits the production of ABA synthase.

项目成果

期刊论文数量（6）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

シロイヌナズナのストレス応答性転写因子の翻訳後制御に関わるプロテインキナーゼの同定

拟南芥中参与应激反应转录因子翻译后调节的蛋白激酶的鉴定

DOI：
发表时间：
2023
期刊：
影响因子：
0
作者：
家田愛菜;峠隆之;渡邉むつみ;中澤透子，杉本蒼，高橋亮輔，船守晴帆，高橋史憲，中道範人，木下俊則，篠崎一雄，篠崎和子，溝井順哉
通讯作者：
中澤透子，杉本蒼，高橋亮輔，船守晴帆，高橋史憲，中道範人，木下俊則，篠崎一雄，篠崎和子，溝井順哉

植物の概日時計転写因子における低温ストレス特異的分解機構の解明

阐明植物生物钟转录因子的冷胁迫特异性降解机制

DOI：
发表时间：
2023
期刊：
影响因子：
0
作者：
早川修平;Chaiwat Aneklaphakij;渡邉むつみ;峠隆之;大川直輝，高橋史憲，溝井順哉，篠崎一雄，篠崎和子，城所聡
通讯作者：
大川直輝，高橋史憲，溝井順哉，篠崎一雄，篠崎和子，城所聡

アグリバイオ

农业生物

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
小山にこ;谷重ひなた;宮内綾乃;山中仁木;増山律子
通讯作者：
増山律子

イネの高温ストレス応答を制御するシグナル伝達機構の解明

阐明控制水稻高温胁迫反应的信号转导机制

DOI：
发表时间：
2023
期刊：
影响因子：
0
作者：
新屋和花;清水崇史;渡邉むつみ;峠隆之;石井大佑;古橋真由子，小川大輔，米丸純一，高橋史憲
通讯作者：
古橋真由子，小川大輔，米丸純一，高橋史憲

乾燥ストレス応答に関わる新規膜タンパク質の機能解析

参与干旱胁迫反应的新型膜蛋白的功能分析

DOI：
发表时间：
2023
期刊：
影响因子：
0
作者：
Maria Kenosis Emmanuelle Galingay Lachica;Mutsumi Watanabe;Takayuki Tohge;石井大佑;吉田将徳・桑田力真・伊藤嵩人・林幹大・石井大佑;大谷晴香，井上和奏，鈴木健裕，堂前直，高橋史憲
通讯作者：
大谷晴香，井上和奏，鈴木健裕，堂前直，高橋史憲