B3転写因子による乾燥ストレス応答において機能するペプチド受容シグナルの制御機構

B3转录因子调控干旱胁迫反应的肽受体信号机制

• 批准号: 22H02650
• 负责人: 高橋 史憲
• 金额: $ 10.82万
• 依托单位: Tokyo University of Science
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22H02650/
• 关键词: 環境応答; 植物ホルモン; タンパク質リン酸化; 転写調節

乾燥ストレス応答におけるペプチド－受容体の下流で機能する細胞内分子制御機構の解明を目的として、ABA合成酵素の発現を制御するB3転写因子に着目し、その機能解析を行った。GFP融合B3転写因子を野生型およびbam受容体変異体に導入し、乾燥ストレス条件下でのABA合成酵素の発現変動を解析した。その結果、B3-TF-GFP/野生型では、ABA合成酵素の発現がストレス条件下で高発現したのに対し、B3-TF-GFP/bam変異体では、ABA合成酵素の発現が抑制されていた。これらの結果は、B3-TFがBAM受容体の下流でABA合成酵素の発現を制御していることを示す。次に、共免疫沈降法によりB3-TF-GFPを野生型およびbam変異体から抽出した後、高分解能質量分析装置を用いて、乾燥ストレス条件におけるB3-TFのタンパク質修飾を解析した。その結果、B3-TFは乾燥ストレス依存的にリン酸化修飾を受けることを明らかにした。このリン酸化修飾部位は複数存在したため、リン酸化部位を含む周辺のアミノ酸配列を指標にモチーフ検索を行った結果、環境ストレス応答で機能する代表的なタンパク質リン酸化酵素のターゲット配列が含まれることを明らかにした。そこで複数のタンパク質リン酸化酵素群に着目し、野生型およびbam変異体を用いてGFP融合過剰発現植物体を作成した。またin vitorリン酸化アッセイを確立する目的で、GSTやMBPタグを融合させた各種タンパク質リン酸化酵素群およびB3-TFのコンストラクションを作成し、大腸菌内で培養し精製タンパク質の準備を進めた。これらの結果から、ペプチド－受容体の下流において、B3-TFがタンパク質リン酸化酵素による制御を受けてABA合成酵素の発現を制御しているシグナル伝達経路の存在を明らかにすることができた。

Dry ス ト レ ス 応 answer に お け る ペ プ チ ド - function of the capacity of body の obscene で す る intracellular molecular system royal institution の interpret を purpose と し て ABA synthesis and enzyme の 発 now を suppression す る B3 planning write factor に mesh し, そ の line function analytical を っ た. GFP fusion B3転 writing factor を wild-type およびbam receptor variant に introduction <s:1> drying ストレス conditions で <s:1> ABA synthesis enzyme <e:1> changes を analysis た た そ の results, B3 - TF - GFP/wild-type で は ABA synthesis and enzyme の 発 now が ス ト レ ス で under the condition of high 発 now し た の に し seaborne, B3 - TF - GFP/bam - variant で は ABA synthesis and enzyme の 発 now が inhibit さ れ て い た. The <s:1> れら <s:1> results of, B3-TFがBAM receptor <s:1> downstream でABA synthetic enzyme <e:1> occurrence を control <s:1> て る る る とを とを す show す. Time に, immune sink method に よ り B3 - TF - GFP を wild-type お よ び bam - variant か ら spare し た, high decomposition can quality analysis device after を with い て, dry ス ト レ ス conditions に お け る B3 - TF の タ ン パ ク qualitative analytical し modified を た. そ の results, dry B3 - TF は ス ト レ ス dependent に リ ン acidification modified を by け る こ と を Ming ら か に し た. こ の リ ン acidification modified parts exist は plural し た た め, リ ン を acidification parts including む weeks 辺 の ア ミ ノ acid with column を index に モ チ ー フ 検 cable line を っ た results, environmental ス ト レ ス 応 function of a で す る represent な タ ン パ ク qualitative リ ン acidification enzyme の タ ー ゲ ッ ト match column が containing ま れ る こ と を Ming ら か に し た. そ こ で plural の タ ン パ ク qualitative リ ン acidification enzyme group に mesh し, wild type お よ び bam - variant を with い て GFP fusion before turning 発 plant を now done し た. ま た in vitor リ ン acidification ア ッ セ イ を establish す る purpose で, GST や MBP タ グ を fusion さ せ た various タ ン パ ク qualitative リ ン acidification enzyme group お よ び B3 - TF の コ ン ス ト ラ ク シ ョ ン を made し, coliform で train し refined タ ン パ ク qualitative の prepare を into め た. こ れ ら の results か ら, ペ プ チ ド - the capacity of body の obscene に お い て, B3 - TF が タ ン パ ク qualitative リ ン acidification enzyme に よ る suppression を by け て ABA synthesis enzyme の 発 now を suppression し て い る シ グ ナ ル 伝 da 経 road の exist を Ming ら か に す る こ と が で き た.

项目成果

シロイヌナズナのストレス応答性転写因子の翻訳後制御に関わるプロテインキナーゼの同定

拟南芥中参与应激反应转录因子翻译后调节的蛋白激酶的鉴定

• 发表时间: 2023
• 作者: 家田愛菜;峠隆之;渡邉むつみ;中澤 透子，杉本 蒼，高橋 亮輔，船守 晴帆，高橋 史憲，中道 範人，木下 俊則，篠崎 一雄， 篠崎 和子，溝井 順哉
• 通讯作者: 中澤 透子，杉本 蒼，高橋 亮輔，船守 晴帆，高橋 史憲，中道 範人，木下 俊則，篠崎 一雄， 篠崎 和子，溝井 順哉

植物の概日時計転写因子における低温ストレス特異的分解機構の解明

阐明植物生物钟转录因子的冷胁迫特异性降解机制

• 发表时间: 2023
• 作者: 早川修平;Chaiwat Aneklaphakij;渡邉むつみ;峠隆之;大川 直輝，高橋 史憲，溝井 順哉，篠崎 一雄，篠崎 和子，城所 聡
• 通讯作者: 大川 直輝，高橋 史憲，溝井 順哉，篠崎 一雄，篠崎 和子，城所 聡

アグリバイオ

农业生物

• 发表时间: 2021
• 作者: 小山 にこ;谷重 ひなた;宮内 綾乃;山中 仁木;増山 律子
• 通讯作者: 増山 律子

イネの高温ストレス応答を制御するシグナル伝達機構の解明

阐明控制水稻高温胁迫反应的信号转导机制

• 发表时间: 2023
• 作者: 新屋和花;清水崇史;渡邉むつみ;峠隆之;石井大佑;古橋 真由子，小川 大輔，米丸 純一，高橋 史憲
• 通讯作者: 古橋 真由子，小川 大輔，米丸 純一，高橋 史憲

乾燥ストレス応答に関わる新規膜タンパク質の機能解析

参与干旱胁迫反应的新型膜蛋白的功能分析

• 发表时间: 2023
• 作者: Maria Kenosis Emmanuelle Galingay Lachica;Mutsumi Watanabe;Takayuki Tohge;石井大佑;吉田将徳・桑田力真・伊藤嵩人・林幹大・石井大佑;大谷 晴香，井上 和奏，鈴木 健裕，堂前 直，高橋 史憲
• 通讯作者: 大谷 晴香，井上 和奏，鈴木 健裕，堂前 直，高橋 史憲