Identification of novel granulocyte/monocyte progenitors and elucidation of myeloid cell developmental pathway

新型粒细胞/单核细胞祖细胞的鉴定和骨髓细胞发育途径的阐明

基本信息

批准号：
22H02855
负责人：
小内伸幸
金额：
$ 11.07万
依托单位：
Kanazawa Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

マウス多能性前駆細胞(multipotent progenitors: MPPs)中にCタイプレクチンであるCLEC12Aを発現する新規細胞群を同定した。そこで、マウス骨髄から系列細胞マーカー陰性分画を粗精製し12種類の細胞表面マーカー抗体を用いて多重染色を行い、viSNE解析を行ったところ、CLEC12A+CD135-細胞が新規細胞分画として同定された。このCLEC12A+CD135-細胞をセルソーターによって純化し、骨髄球-赤血球系細胞への分化能力を検討するためにin vitroコロニー形成実験を行なった。この結果、CLEC12A+CD135-細胞は顆粒球、単球及び顆粒球/単球のコロニーを形成し、赤血球系細胞のコロニーは形成しなかった。また、同細胞をM-CSF存在下で培養するとマクロファージへと効率良く分化した。さらに、マウスストローマ細胞との共培養系を用いてリンパ球への分化能を検討したがT細胞及びB細胞への分化能は検出されなかった。次にin vivoにおける分化能を検討するため、CAG-EGFP Tgマウスの骨髄から2x104個のCLEC12A+CD135-細胞を純化し、B6・SJLマウスに移植した。移植後、継時的に末梢血を採血しCLEC12A+CD135-細胞由来の娘細胞の表現型を解析した。この結果、in vitroの実験結果と同様にCLEC12A+CD135-細胞は顆粒球と単球のみに分化した。これらのin vitro及びin vivoにおける分化能の解析結果から、CLEC12A+CD135-細胞は新規顆粒球/単球前駆細胞であると結論づけた。

在鼠多能祖细胞（MPPS）中鉴定出一种表达C型凝集素CLEC12A的新的细胞。因此，从小鼠骨髓中粗略地纯化了阴性谱系细胞标记分数，并使用12种类型的细胞表面标记抗体进行了多种染色，并进行了Visne分析，并将CLEC12A+CD135-细胞鉴定为新的细胞分数。 CLEC12A+CD135细胞通过细胞分散剂纯化，并进行了体外集落形成实验，以研究分化为髓落细胞细胞的能力。结果，CLEC12A+CD135细胞形成粒细胞，单核细胞和粒细胞/单核细胞菌落，没有红细胞细胞的菌落。此外，当细胞在M-CSF存在下培养时，它们有效地分化为巨噬细胞。此外，使用与小鼠基质细胞的共培养系统研究了分化为淋巴细胞的能力，但是未检测到对T细胞或B细胞的分化。接下来，为了研究体内分化电位，从CAG-EGFP TG小鼠的骨髓中纯化了2x104 CLEC12A+CD135细胞，并植入B6.SJL小鼠中。移植后，一次收集外周血，以分析源自Clec12a+CD135细胞的子细胞的表型。结果，CLEC12A+CD135细胞分化为粒细胞和单核细胞，类似于体外实验结果。这些分化潜力在体外和体内的分析得出的结论是，CLEC12A+CD135细胞是新型的粒细胞/单核细胞祖细胞。

项目成果

期刊论文数量（4）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Monocyte derived dendritic cells perform hemophagocytosis to fine-tune excessive immune responses during chronic virus infection.

单核细胞衍生的树突状细胞执行噬血作用，以微调慢性病毒感染期间的过度免疫反应。

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
Tchen John;Simon Quentin;Chapart L?a;Pellefigues Christophe;Karasuyama Hajime;Miyake Kensuke;Blank Ulrich;Benhamou Marc;Daugas Eric;Charles Nicolas;竹馬　俊介;Nobuyuki Onai
通讯作者：
Nobuyuki Onai

A Novel CD135+ Subset of Mouse Monocytes with a Distinct Differentiation Pathway and Antigen-Presenting Properties

具有独特分化途径和抗原呈递特性的新型小鼠单核细胞 CD135 亚群

DOI：
10.4049/jimmunol.2100024
发表时间：
2022
期刊：
The Journal of Immunology
影响因子：
0
作者：
Kamio Naoka;Yokota Asumi;Tokuda Yuichi;Ogasawara Chie;Nakano Masakazu;Nagao Miki;Tashiro Kei;Maekawa Taira;Onai Nobuyuki;Hirai Hideyo
通讯作者：
Hirai Hideyo

An optimized small molecule inhibitor cocktail supports maturation of dendritic cells in human monocyte derived dendritic cell culture system.

优化的小分子抑制剂混合物支持人单核细胞衍生的树突细胞培养系统中树突细胞的成熟。