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胎生期及び成人期血液前駆細胞の胸腺へのホーミング機構、胸腺内細胞移動機序の解明

阐明胚胎和成体血液祖细胞向胸腺的归巢机制以及胸腺内的细胞迁移机制

基本信息

批准号：
13770158
负责人：
小内伸幸
金额：
$ 1.34万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770158/
关键词：
ケモカインケモカインレセプター CCL25 CCR9 クリプトパッチ IEL

项目摘要

胸腺微小環境においてT前駆細胞は皮膜下、皮質、髄質へと移行する過程で分化、増殖し、最終的に成熟T細胞となって末梢へ移行する。しかしながら、現在まで、この胸腺内細胞移動、分化を調節するケモカイン・ケモカインレセプターは明らかになっていない。本研究では、胸腺内細胞移動を制御すると考えられケモカインレセプターCCR9の細胞表面発現を抑制するintracellular chemokine "CCL25/TECK-intrakine(IK)"を発現する再構築マウスを作製し、その表現型を解析した。結果GFPおよびCCL25-IK導入マウス由来の末梢血、骨髄、胸腺および脾臓細胞は80〜90%以上のGFP陽性率が認められ、高い構築率を示した。また胸腺細胞のCCL25に対する走化能は著しく減少したが、胸腺、脾臓細胞ではCXCL12に対する走化能において量マウス間では変化は認められなかった。GFPおよびCCL25-IK導入マウス由来の末梢血、骨髄、胸腺および脾臓における総細胞数に顕著な変化は認められなかった。また、胸腺脾臓における各T細胞分画(CD4、CD8、TCRαβ)には変化は認められなかった。CCL25-IK導入マウスの小腸のIELに顕著な減少が認められた。さらに、CD8αα、CD4/CD8、TCRαβ、TCRγδ、CD3/αEβ7の各IELの著しい減少が認められたが、胸腺由来のCD8αβIELに変化は認められなかった。さらに免疫組織染色により小腸のCD8+IEL、胸腺非依存性IELの分化リンパ組織であるクリプトパッチの数および細胞数(c-kit+細胞)の著しい減少が認められた。蛍光免疫2重染色法によって、CCL25の発現が4週齢のC57/BL6マウス由来の小腸のクリプトパッチ中のCD11c+細胞に認められた。CCL25に対する走化性が骨髄のc-kit+Lin-細胞には認められたが、c-kit-Lin+細胞には認められなかった。また、RT-PCRによりCCR9の発現がc-kit+Lin-細胞に認められた。以上の結果から、CCL25/CCR9は小腸における胸腺非依存性IELの分化の場であるリンパ球集積組織クリプトパッチの形成、それに引き続いて出現してくるIELの分化を制御していることが強く示唆された。しかしながら、胸腺内細胞移動および分化には重要な役割を担っていないことが示唆された。

In the thymic microenvironment, T cells migrate from subepithelial, cortical, and cytoplasmic layers to differentiation, proliferation, and terminal migration. The regulation of intrathymic cell movement and differentiation in the thymus In this study, we examined the inhibition of intracellular chemokine "CCL25/TECK-introkine (IK)" on the cell surface expression of CCR9 in thymocytes, and reconstructed its phenotype analysis. Results GFP and CCL25-IK were introduced into peripheral blood, bone marrow, thymus and spleen cells, and the GFP positive rate was more than 80 ~ 90%. CXCL 25 cells have decreased their chemical activity, while CXCL12 cells have decreased their chemical activity. GFP and CCL25-IK are introduced into the peripheral blood, bone marrow, thymus and spleen. The T cell subsets (CD4, CD8, TCRαβ) of the thymus and thymus are transformed into T cells. CCL25-IK introduced into the small intestine CD8 αα, CD4/CD8, TCRαβ, TCRγδ, CD3/αEβ7 and CD8 αβIEL decreased, and thymus origin decreased. The number of CD8 +IEL and thymic independent IEL in the differentiated tissues of the small intestine and thymus were significantly reduced by immunostaining. C57/BL6 cells were detected in CD11 cells in the small intestine after 4 weeks of CCL-25 development. CCL25 is a chemical inhibitor of c-kit+Lin-cells. Also, the discovery of CCR9 in RT-PCR was recognized in c-kit+Lin-cells. CCL25/CCR9 showed strong inhibition of differentiation of IEL in the small intestine and thymus. In addition, cell migration and differentiation in the thymus are important for the development of thymic diseases.