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ユビキチン活性化酵素の細胞複製における役割

泛素激活酶在细胞复制中的作用

基本信息

批准号：
03261215
负责人：
金田澄子
金额：
$ 1.47万
依托单位：
National Institute of Genetics
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

ユビキチン系は、短命あるいは異常タンパク質の分解に関わることが知られてきたが、近年、サイクリンなど細胞周期の進行に重要な働きをするタンパク質がユビキチン系で分解されることが明らかになり、細胞の基本的な機能制御にも関与していることが示唆された。実際、細胞周期の温度感受性突然変異株の多くが、ユビキチン活性化酵素の変異株であり、制限温度下でG2期に停止する。今回、チミン飢餓によるS期に同調したDNA分解に抵抗性の変異株を分離したところ、すべてDNAポリメラ-ゼまたはユビキチン活性化酵素の変異株であり、このことは、ユビキチン系がS期においても基本的機能の発現に関わっていることを示すものである。同調して制限温度下の停止点を調べたところ、G1、S期でも停止することがわかった。一方、これらの変異株を相補するヒトおよびマウスのcDNAを分離し、構造を決定した。これらのcDNAは3.5kb長で1058アミノ酸をコ-ドしていた。ヒトとマウスの間ではアミノ酸で95%ホモロジ-を示した。この結果を基に各変異株の変異点を同定したところ、すべてタンパク質のC末端側にある事が明らかになった。ユビキチン活性化酵素によって活性化されたユビキチンは、一群のファミリ-タンパク質であるユビキチンキャリアタンパク質に転移されるが、上記の結果は、ユビキチン活性化酵素のC末端側にユビキチンキャリアタンパク質と相互作用する部位があることを示唆する。又、ユビキチン活性化酵素cDNAを変異株に導入したところ、変異株により形質転換効率に大きな違いがあり、更に、このような構成的な発現は細胞の表現型にも影響を及ぼし、DNA量の倍化した細胞の出現や細胞死をもたらした。このことは細胞周期においてユビキチン化タンパク質のレベルが厳密に制御されている可能性を示唆している。

In recent years, cell cycle progression is important for cell quality, cell system decomposition, and cell basic function control. In real time, the temperature sensitivity of cell cycle suddenly changes, the activity of enzyme changes, and the G2 phase stops at the limiting temperature. In the present study, we found that DNA isozyme was involved in the development of S phase DNA isozyme, and that the DNA isozyme was involved in the development of S phase DNA isozyme. Stop point at the isochronous limit temperature. Stop point at G1, S. The cDNA sequence of the two mutants was isolated and the structure determined. The cDNA was 3.5 kb long and 1058 kb long. 95% of the time. The result is that the difference between the two plants is the same. The above results show that the C-terminal side of the activated enzyme is a site of interaction between a group of proteins and a group of proteins. In addition, the expression of active enzyme cDNA in different plants is affected by the phenotype of cells and the amount of DNA in different plants is increased. This is the first time that the cell cycle has changed.