神経伝達物質放出の制御における細胞骨核及びその調節系の関与

细胞核及其调节系统参与神经递质释放的控制

• 批准号: 04267208
• 负责人: 中村 清二
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04267208/
• 关键词: 神経伝達物質; アクチン; アドセバリン; cDNAクローニング

神経細胞や各種分泌細胞の細胞膜近傍にはアクチンを主体としたマイクロフィラメンとのネットワークが存在しrestingの状態では神経伝達物質やホルモン等を含む小胞の膜への接近に対するbarrierを構成している。細胞内Ca^<2+>が上昇するとマイクロフィラメントの断片化が生じ小細の膜への接近が容易になる。即ち伝達物質等の放出が促進される。Ca^<2+>濃度の上昇に応じてアクチンフィラメントの切断活性を持つようになる蛋白としてウシ副腎髄質細胞においてはゲルゾリンとアドセバリン(74KDa蛋白)が知られている。今回我々はアドセバリンに注目し,アドセバリンがin vivoにおいて細胞の興奮(ICa^<2+>Jiの上昇)に応じて実際にマイクロフィラメントを断片化し伝等物質等の放出を促進する機能を持つか否かを調べる目的で先ずアドセバリンcDNAのクローニングを行なった。アドセバリン蛋白の部分ペプチドのアミノ酸配列を決定しそれに基づいてDBApwbesを作製した。これらのプローブを用いてウシ副腎髄質cDNAライブラリーよりいくつかのクローンを得た。これらをつなぎあわせて得られたcDNAはアドセバリンのコーディング領域を全て含んでいた。予測されるアミノ酸配列(アミノ酸715個よりなる分子量約8万の蛋白である)の解析によるアドセバリンはゲルゾリンfamilyに属するがゲルゾリンとは明らかに異なる蛋白であることがわかった。palyphorpho inusitidesの結合に必要な配列も保存されていた。全コーディング領域を含むcDNAをT7プロモーターの下流につなぎ大腸菌内で発現させたところSDS電気流動上の分子量が74kDaの蛋白が得られた。この蛋白は精製しin vitro活性を調べたところ,組織より精製したアドセバリンと同様,Ca^<2+>濃度依存性にアクチンフィラメントを切断する作用を持つことがわかった。

The membrane of neurons and various secretory cells is composed of a barrier to the membrane of neurons. Intracellular Ca^<2+> increases, and fragmentation and membrane formation become easier. That is to say, the release of substances and so on is promoted. The increase of Ca^<2+> concentration caused the breakdown of activity of Ca ^<2 +> protein and protein (74KDa protein) in pararenal cytoplasmic cells. In this paper, we pay attention to the activation of cells in vivo (ICa^<2+>Ji rise), and promote the release of substances such as fragmentation and other substances during the process. DBApwbes are prepared based on the determination of the amino acid sequence of some peptides of the Adenosine protein. This is the first time I've ever seen a person who's been in a relationship with someone else. This is the first time that we've had a chance to find out what's going on in the world. The predicted acid sequence (715 amino acids) and protein with molecular weight of about 80,000 were analyzed. The combination of palypho inutilites is necessary for preservation. A protein with a molecular weight of 74kDa was found in Escherichia coli. The protein is purified in vitro and its activity is regulated. The protein is purified in vitro and its activity is regulated in tissue. The Ca^2+> concentration-dependent protein activity is regulated in vitro and its activity is regulated in tissue.