線虫・C.elegnsにおける基底膜の発生遺伝学的研究

线虫基底膜的发育遗传学研究

• 批准号: 05263219
• 负责人: 城 圭一郎
• 金额: $ 0.9万
• 依托单位: 佐賀医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05263219/
• 关键词: 線虫; 基底膜; ラミニンA

初めに、得られているepi-1遺伝子クローンの塩基配列解析に必要な制限酵素地図の作成を行った。このクローンがもつ約13kbのゲノムDNA上で、EcoRI、KpnI、XbaIの認識部位の位置を決め、これらを利用して塩基配列解析を行なった。現在までに、遺伝子の3´下流域を含めて9kbの塩基配列が得られている。遺伝子配列内には、いくつかのイントロンが同定され、それらの大きさは最小で50bp、最大で160bpと、他の線虫の遺伝子の場合と同様に、小さなものばかりであった。このクローンのDNAをプローブとして線虫のcDNAライブラリィをスクリーニングし、多数のcDNAクローンを得た。これらのクローンのうちで最大のものの塩基配列を決定した。このクローンにはポリA配列があり、この配列を除いて4558bpの配列から成っていた。この大きさは、mRNAの全長の半分の大きさである。この配列にコードされるアミノ酸配列をすでに報告されているマウスのラミニンA鎖のそれと比較した結果、その配列はこのタンパク質のC末側半分に相当していた。この二つの配列のホモロジーは25%程度であったが、マウスの配列内でタンパク構造に重要と考えられているアミノ酸は非常によく保存されていた。得られたcDNAクローンの中には、その制限酵素地図が部分的に他のクローンと異なるものがいくつか存在していた。それらは、ひとつ(#22)を除いてクローニングアーティファクトであった。残るひとつのクローン#22について、オルタナティブスプライシングの可能性を考えて現在解析を進めている。epi-1の新しいmutant alleleを分離解析中であるが、めざすnull alleleはいまだ得られていない。

In the beginning, we got the epi-1 gene sequence analysis, which is necessary to control the enzyme production. The position of EcoRI, KpnI and XbaI recognition sites on DNA was determined and the nucleotide sequence was analyzed. Now, the 3-inch watershed containing the 9-kb base sequence has been successfully mapped. In the sequence of the gene, the smallest is 50bp, the largest is 160bp, the other is the same, the small is the same. The DNA sequence of this gene is obtained from the cDNA sequence of this gene. The maximum number of base pairs is determined. This is a 4558bp sequence. The full length of mRNA is half the length of mRNA. The results of this comparison are shown in the table below, and the results of this comparison are shown in the table below. The structure of the structure is important to the preservation of the structure. In addition, there is a restriction enzyme in the middle of the cDNA library.それらは、ひとつ(#22)を除いてクローニングアーティファクトであった。The possibility of the problem is analyzed in detail. epi-1 is a new mutant allele.