インフルエンザウイルス非構成蛋白(NS2)によるゲノムRNA複製の調節

流感病毒非组成蛋白 (NS2) 对基因组 RNA 复制的调节

• 批准号: 05264204
• 负责人: 小田切 孝人
• 金额: $ 2.88万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05264204/
• 关键词: インフルエンザウイルスA; 非構成蛋白NS2; RNAの転写・複製; 干渉性欠損ウイルス; RNAポリメラーゼ; RNA分節のパッケージング

インフルエンザウイルスの非構成蛋白NS2の機能は、全く不明である。我々は、NS2蛋白の機能解析を目的として作製したNS2変異株の分離に成功した。この変異株はNS2蛋白の機能異常によって、PA遺伝子を欠損した干渉性欠損(DI)ウイルスを産生する。本研究ではNS2変異株を用いて、ウイルスゲノムRNAの複製過程におけるNS2蛋白の機能を解明することを目的として実験を行い、以下の点を明らかにした。1.NS2蛋白はゲノム複製の鋳型となるcRNA合成過程で、ゲノムRNAの一部を欠落したDI-RNAの増幅を抑制し、正常ゲノムRNAが優先的に複製されるように調節する。2.NS2蛋白は感染初期において、cRNA合成を抑制し、ゲノムRNAの初期転写からゲノム複製のcRNA合成過程へのスイッチングの時期を調節する。3.DIウイルス粒子形成過程において、DI-RNAはそれが由来した正常ゲノムRNAより優先的にウイルス粒子へ取り込まれた。これは、細胞膜からウイルス粒子が形成される出芽過程で起こることが明かになった。4.DI-RNAはそれが由来した遺伝子RNAとのみ特異的に競合して選択的にパッケージングされることが明らかになった。このことから、ウイルス粒子形成過程では、各RNA分節を識別する分子識別機構が働く可能性が示唆された。我々はreverse geneticsの手法を駆使して、RNA分節の識別を規定しているゲノムRNA上のシグナルを同定し、これにNS2蛋白がどのように関与しているのか解析を進めている。

We need to know that the mechanism of non-protein NS2 is unknown. Our DNA and NS2 protein machines can be used to analyze the successful isolation of NS2 isolates. The NS2 protein machine of this strain can be used frequently, and the PA protein machine can not be used because of the lack of sexual interference (DI). In this study, the NS2 strain was used to replicate the process of RNA replication. The NS2 protein machine can be used to understand the purpose of this study. The process of 1.NS2 protein replication, the process of cRNA synthesis, the inhibition of DI-RNA in RNA, the replication of RNA in normal DNA. 2.NS2 protein in the early stage of infection, inhibition of cRNA synthesis, and replication of cRNA synthesis in the early stage of RNA. The formation process of 3.DI particles is sensitive to the formation of DI-RNA particles. The reason for the formation of DI-RNA particles is that the particles in the first place are not affected by the normal temperature. In the process of sprouting, the formation of particles, the formation of particles, the formation of particles and the formation of particles. The reason for the 4.DI-RNA malfunction is that the sub-RNA is special and the selected one is the one that knows the details of the message. It is necessary to determine the formation process of the particles, and the possibility of the formation of the particles in each RNA is indicated by different molecular agencies. We use the reverse genetics method to make sure that the information on the RNA is the same as that on the RNA, and that the NS2 protein is analyzed and analyzed.

项目成果

Masashi Urabe: "Persistence of viral genes in a variant of MDCK cell after productive replication of a mutant of influenza virus A/WSN." Arch.Virol.128. 97-110 (1993)

Masashi Urabe：“在 A/WSN 流感病毒突变体有效复制后，MDCK 细胞变体中病毒基因的持久性。”

Takato Odagiri: "Synthesis of the NS2 nonstructural protein messenger RNA of influenza A viruses occurs in the absence of viral protein sythesis." Arch.Virol.120. 281-288 (1991)

Takato Odagiri：“甲型流感病毒 NS2 非结构蛋白信使 RNA 的合成是在没有病毒蛋白合成的情况下进行的。”

Takato Odafiri: "Mutation in NS2,a nonstructural protein of influenza A virus,extragenically causes aberrant replication and expression of the PA gene and leads to--" Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 87. 5988-5992 (1990)

Takato Odafiri：“NS2 是甲型流感病毒的一种非结构蛋白，它的突变会在外部导致 PA 基因的异常复制和表达，并导致——”Proc.Natl.Acad.Sci.USA。

Takato Odagiri: "An amino acid change in the NS2 protein of an influenza A virus mutant causes generation of defective interfering(DI)particles by amplifying DI RNAs and" J.Gen.virol.75. 43-53 (1994)

Takato Odagiri：“甲型流感病毒突变体的 NS2 蛋白中的氨基酸变化导致通过放大 DI RNA 产生有缺陷的干扰 (DI) 颗粒，”J.Gen.virol.75。

Takato Odagiri: "Reversed misreading of a GC doublet by the modified T7 DNA polymerase,Sequenase." Virus Genes. (in press). (1994)

Takato Odagiri：“通过改良的 T7 DNA 聚合酶、测序酶逆转了 GC 双联体的误读。”