ル-ピン根による酸性フォスファターゼ分泌能の遺伝子解析とリン欠乏耐性植物の育成

羽扇豆根分泌酸性磷酸酶能力的遗传分析及耐缺磷植物的发育

• 批准号: 09248201
• 负责人: 但野 利秋
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09248201/
• 关键词: 酸性フォスファターゼ; 分泌; ル-ピン; P欠乏; 遺伝子解析; cDNAライブラリー; mRNA; 塩基配列

ル-ピンを標準リン濃度区とリン欠如区を設けて水耕培養し、経時的に根をサンプリングした。発現したmRNAの定量のためにノーザンブロット解析を、合成されたタンパク質の定量のためにウェスタンブロット解析を行った。リン欠如処理開始後3日目にはmRNAの発現が高まり、続いて分泌性酸性フォスファターゼタンパク質の合成も高まった。低リン処理による誘導はmRNAの発現量に比べてタンパク合成量の方が顕著に高かった。これは転写→翻訳の段階で何らかの合成促進機構が存在することによると考えられるが、現段階では別の器官で合成された本酵素が根に輸送されている可能性も否定できない。ル-ピン切断根を無菌的に標準リン濃度処理とリン欠如処理をした寒天培地上に置き、数時間毎に分泌された酸性フォスファターゼの活性染色を行った。酸性フォスファターゼ活性は、リン欠如処理により24時間以内の短期間に誘導された。このときのリン含有率に差はなかった。なおここには示していないが、個体レベルでもほぼ同様の応答がみられた。この結果から、ル-ピン根による酸性フォスファターゼの分泌は外部リン濃度に依存して起きる応答であることが示唆された。前年度の実験において、ル-ピンのゲノムライブラリーから1つの陽性クローンが得られた。現在このクローンについて解析中であるが、このクローンに含まれる配列と前年度決定したLASAP1とは非常に高い相同性を持つものの、配列の異なるクローンであることが明らかとなった。このことは、これら二つの遺伝子に由来するアイソザイムが存在するか、または分泌性酸性フォスファターゼが分子量やアミノ酸配列が非常に似通った二つのサブユニットからなるヘテロダイマーである可能性が考えられる。

The standard concentration zone is set up in the hydroponic culture and the root zone is set up in the hydroponic culture. The quantitative analysis of mRNA was carried out by means of synthesis. 3 days after the start of treatment, the expression of mRNA was high, and the secretion of acid was high. The expression of mRNA induced by low concentration treatment was higher than that induced by low concentration treatment. In this case, it is possible that the synthesis promotion mechanism exists in the reverse phase and the reverse phase, and the synthesis promotion mechanism exists in the reverse phase and the reverse phase. The root of the disease is sterile, and the concentration of the disease is low. The activity of the acid complex was induced within 24 hours. The difference between the content of the two substances is not obvious. In addition to the above, it is also possible to use the same method to solve the problem. The result is that the acid content of the protein is dependent on the concentration of the protein. In the previous year, the number of cases was reduced to 1, and the number of cases was reduced to 1. Now, in the analysis of this problem, we can find out the difference between LASAP1 and LASAP1 in the previous year. The molecular weight of the acid is very similar to that of the acid.

项目成果

Li M, Shinano T, and Tadano T: "Distribution of exudates of lupin roots in the rhizosphere under phosphorus deficient conditions." Soil Sci.Plant Nutr.43. 237-245 (1997)

Li M、Shinano T 和 Tadano T：“缺磷条件下羽扇豆根系分泌物在根际的分布。”

Li M, Osaki M, Honma M, and Tadano T: "Purification and characterization of phytase induced in tomato roots under phosphorus-deficient conditions." Soil Sci.Plant Nutr.43. 179-190 (1997)

Li M、Osaki M、Honma M 和 Tadano T：“缺磷条件下番茄根中诱导的植酸酶的纯化和表征。”

Wasaki J, Ando M, Ozawa K, Omura M, Osaki M, Ito H, Matsui H, and Tadano T: "Properties of secretory acid phosphatase from lupin roots under phoshorus-deficient conditions" Soil Sci.Plant Nutr.43. 981-986 (1997)

Wasaki J、Ando M、Ozawa K、Omura M、Osaki M、Ito H、Matsui H 和 Tadano T：“缺磷条件下羽扇豆根分泌酸性磷酸酶的特性”土壤科学.植物营养.43。

Wasaki J, Omura M, Osaki M, Ito H, Matsui H, and Tadano T: "Function,properties and genetic analysis of secretory acid phosphatase from lupin roots under phosphorus-deficient conditions" Proceedings of international workshop on new concepts of plant nutri

Wasaki J、Omura M、Osaki M、Ito H、Matsui H 和 Tadano T：“缺磷条件下羽扇豆根分泌酸性磷酸酶的功能、性质和遗传分析”植物营养新概念国际研讨会论文集