血液細胞を機構制御する抗血栓性高分子材料の合成と評価

机械控制血细胞的抗血栓高分子材料的合成与评价

• 批准号: 01604594
• 负责人: 讃井 浩平
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Sophia University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 1990
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-01604594/
• 关键词: 血小板; 血液適合性; 細胞内遊離カルシウム; マルチブロック共重合体; 接触活性化; 血漿タンパク

細胞と直接接触する条件下で使用される種々の生医学材料を設計する上で、材料表面が細胞に与える影響、特に細胞の活性化を高感度で評価することが必要である。本研究では、外部刺激に対する細胞内の二次メッセンジヤ-である細胞内遊離カルシウムイオンを定量することにより、高分子材料表面との接触による血小板の活性化反応を経時的に測定することを目的とした。Ca^<2+>結合性蛍光化合物Fura2を負荷した血小板にポリスチレンラッテクスを添加すると、[Ca^<2+>]iは速やかに増加し、血小板がラテックスとの接触により活性化することを示す。しかしながら、ラテックス表面を予めアルブミンで処理することにより[Ca^<2+>]iの増加は大きく抑制された。つまり、[Ca^<2+>]i測定により血小板の材料表面との接触による活性化を評価できることが明らかである。この結果を踏まえ、既に著者等により優れた抗血栓性を有することが明らかにされているポリエ-テルセグメント化ポリアミドの結晶-非晶ミクロ不均一構造表面の抗血栓性発現機序について検討を加えた。各高分子材料との接触による血小板の活性化挙動は、各材料をコ-テイングしたガラスビ-ズを充填したカラムにFura2を負荷した血小板を流し、その前後における[Ca^<2+>]i変化からその増加量を求めた。流速あるいはカラム長を変えることにより血小板の接触活性化を高感度で定量できることがわかった。均一表面であるホモポリマ-に比べミクロ不均一構造を有するポリエ-テルセグメント化ポリアミド表面では、血小板の[Ca^<2+>]iの増加量が少なく、このポリマ-表面が、血小板の接触活性化を抑えることにより優れた血液適合性を発現していることが明らかにされた。同様な結果は、ポリマ-表面にタンパク吸着層を形成させた場合にも観察され、ポリマ-表面の構造を反映したタンパク吸着層を形成することにより血小板の接触活性化が抑制されているものと考えられる。

It is necessary to evaluate the effect of cell surface on the design of biomedical materials used in direct contact with cells and the high sensitivity of cell activation. The purpose of this study is to quantify intracellular secondary reactions to external stimuli, to measure platelet activation reactions to contact with polymer surfaces, and to measure intracellular free radicals. Ca^<2+> binding photoactive compound Fura2 loading, platelet activation,[Ca^<2+>]i increase, platelet activation [Ca^<2+>]i increase and decrease. [Ca^<2+>]i determination, platelet activation evaluation, and surface contact. The results show that the antithrombotic properties of crystalline and amorphous surfaces are excellent, and the antithrombotic properties of crystalline and amorphous surfaces are excellent. The activation of platelets in contact with each polymer material, the filling of each material, the loading of Fura2, the activation of platelets, the increase of [Ca^<2 +>] i before and after the contact of each material, and the increase of [Ca^<2+>]i. Flow Rate: High Sensitivity of Platelet Contact Activation Homogeneous surface is more than heterogeneous structure, and the increase of platelet [Ca^<2+>]i is less than homogeneous surface, and the contact activation of platelets is inhibited. The same results were obtained when the adsorption layer was formed on the surface of the platelet and the contact activation of the platelet was inhibited.

项目成果

N. Yui et al: "Change in cytoplasmic free Ca^<+2> concentration in rabbit platelets contacting with albumin coated and uncoated polystyrene surfaces" Biomaterials. 10. 309-312 (1989)

N. Yui 等人：“与白蛋白包被和未包被的聚苯乙烯表面接触的兔血小板中细胞质游离Ca 2+ 浓度的变化”生物材料。