リボソ-ム蛋白の進化

本研究は、生体の最も基本的な構成分の一つであるリボソ-ムの構成蛋白と、その遺伝子の比較生化学的検討によつて、進化の跡をたどろうとするものである。cDNAクロ-ニングによって、ラットのリボソ-ム蛋白の構造決定を行い、すでに8種の蛋白について報告しているが、本年度は更にL7a、L37aの一次構造を発表することができた。また、これらに相当する蛋白は哺乳類以外では知られていないので、鶏のcDNAライブラリ-より、cross-hybridizationによって相当するクロ-ンを得て、塩素配列を決定し、比較した。リボソ-ム蛋白遺伝子の構成については、哺乳類のみに、多数のprocessed pseudogeneを含むmultigene family構造の存在することを示すことができたが、一方では、このような多数の偽遺伝子に阻まれて、発現している真正遺伝子のクロ-ン化と解析には成功していない。このような困難を克服するため、核内のmRNA前駆体に対するcDNAクロ-ンを単離し、このイントロン部分をプロ-ブとする,あるいはpolymerase chain reactionによって、遺伝子のイントロン部分を増幅し、これプロ-ブとして遺伝子クロ-ンの選択を行う方法などについて検討を重ねて来た。現在、方法論的にはほぼ解決されたので、PCR法を利用した遺伝子クロ-ニングを開始しようとしている。またこのような比較生化学的研究には、多くの研究室で行なわれた配列決定の結果を、デ-タベ-スとして持ち、常に比較検討して行く必要がある。この目的で、欧米数カ所の研究室の協力を得て、リボソ-ム蛋白アミノ酸配列デ-タベ-スを構築、維持している。現在600種以上の配列を含むほぼ完全なものとなり、いくつかの相同蛋白系列が発見された。また多くの研究室に配布利用されている。

本研究は、生体の最も基本的な構成分の一つであるリボソ-ムの構成蛋白と、その遺伝子の比較生化学的検討によつて、進化の跡をたどろうとするものである。cDNAクロ-ニングによって、ラットのリボソ-ム蛋白の構造決定を行い、すでに8種の蛋白について報告しているが、本年度は更にL7a、L37aの一次構造を発表することができた。また、これらに相当する蛋白は哺乳類以外では知られていないので、鶏のcDNAライブラリ-より、cross-hybridizationによって相当するクロ-ンを得て、塩素配列を決定し、比較した。リボソ-ム蛋白遺伝子の構成については、哺乳類のみに、多数のprocessed pseudogeneを含むmultigene family構造の存在することを示すことができたが、一方では、このような多数の偽遺伝子に阻まれて、発現している真正遺伝子のクロ-ン化と解析には成功していない。このような困難を克服するため、核内のmRNA前駆体に対するcDNAクロ-ンを単離し、このイントロン部分をプロ-ブとする,あるいはpolymerase chain reactionによって、遺伝子のイントロン部分を増幅し、これプロ-ブとして遺伝子クロ-ンの選択を行う方法などについて検討を重ねて来た。現在、方法論的にはほぼ解決されたので、PCR法を利用した遺伝子クロ-ニングを開始しようとしている。またこのような比較生化学的研究には、多くの研究室で行なわれた配列決定の結果を、デ-タベ-スとして持ち、常に比較検討して行く必要がある。この目的で、欧米数カ所の研究室の協力を得て、リボソ-ム蛋白アミノ酸配列デ-タベ-スを構築、維持している。現在600種以上の配列を含むほぼ完全なものとなり、いくつかの相同蛋白系列が発見された。また多くの研究室に配布利用されている。