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カルシウムイオンによる筋収縮制御機構のクライオ電子顕微鏡法による構造研究

利用冷冻电子显微镜研究钙离子控制肌肉收缩机制的结构

基本信息

批准号：
01657504
负责人：
富岡明宏
金额：
$ 1.09万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1989
资助国家：
日本
起止时间：
1989 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1 溶液中で、アクチン・トロポミオシン・トロポニン複合体のマグネシウム・パラクリスタルをCa高濃度下で作製し、最良の結晶化条件を探した。電子顕微鏡法による構造解析の結果、1)並進濾過像は明瞭な方向性、即ち、“spearhead"パタ-ンを示すことを発見した。2)豊島、若林のアクチン・トロポミオシン・S1モデルと計算機でフィッティングし、アクチンのミオシン結合部位を三次元構造上で固定した。3)フィラメントから切り出した単位構造は内部に低密度領域をもち、large domainとsmall domainに分割でき、X線結晶解析のアクチンモデルとよく対応する。4)左管一重らせんに沿うアクチン分子は各々のlarge domainが「柱状構造」で連結している。この「柱状構造」は高い密度をもち、細いフィラメントの堅固な骨格を形成していると考えられる、の四点の知見が得られた。2 分子内ドメイン構造を高い信頼性で議論するためには、より結晶性の良い二次元結晶を作製することが必要である。この目的のため試みた脂質単分子膜への吸着法は水面の平面性を利用する画期的な技術であり、理想的な二次元結晶を得ることが期待される。中性pHでアクチンが負の電荷をもつことを利用し、正電荷をもたせた脂質単分子膜へアクチンを静電的に吸着様せ結晶化を行った。電子顕微鏡による観察の結果、約30分のインキュベ-ションにより大きなパラクリスタルを成長させることが解った。一晩以上を要する溶液中での結晶化と比べてより大きなパラクリスタルがより速く得られることが解り、この方法の有効性が証明された。

1. In the solution, the temperature, temperature The results of computer simulation and analysis by computer microanalysis, 1) and through the image to understand the direction, that is, "spearhead" signal-to show that you can see how you feel. 2) if you are in the forest, please do so. The S1 computer is used to fix the three-dimensional structure of the joint part of the computer. 3) the data location is used to create the internal low-density field data, the large domain small domain is divided, and the X-ray results are analyzed. 4) the left tube has a heavy load along which the molecules are connected to each other in the shape of the large domain. The shape of the cylinder is high, the density is high, the density is high, the bone is fixed, the bone is fixed, and the four points are known. (2) the two-dimensional structure of the two-dimensional structure of the two-dimensional structure is necessary for the formation of high-reliability properties in the molecule. Objective to study the molecular membrane adsorption method and the planarity of the water surface by using the technical techniques of the painting period and the ideal two-dimensional structure. The neutral pH is characterized by the crystallization of the absorption spectra of the molecular membrane by the use of positive and negative charge temperature. The results of the results are monitored by computer microcomputers, and the results are about 30 minutes after each other. The results of crystallization in more than one solution are much faster than those in the solution, and the method is effective.