ミクロ多相系バイオアクタ-の特性と物質合成への応用

微多相生物反应器的特性及其在材料合成中的应用

基本信息

批准号：
02205018
负责人：
木瀬秀夫
金额：
$ 1.47万
依托单位：
University of Tsukuba
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1990
资助国家：
日本
起止时间：
1990 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

酵素を含むミクロな多相反応系を構築し、その構成成分間の相互作用から生まれる高度の複合機能を明らかにすると共に、新しいバイオアクタ-としての有用性を実証することを目的に研究を行い、以下の成果を得た。1。水ー有機溶媒系でプロテア-ゼによるアミノ酸エステルの加水分解を行い、酵素活性と立体特異性の溶媒組成依存性を詳細に検討した。その結果、高濃度(90%以上)の親水性有機溶媒(例えばアセトニトリル)中では、酵素は高い活性を保持し、また水中と比較してはるかに高い立体特異性を示することを見いだした。この結果を利用して、高効率で分離の容易なアミノ酸の光学分割法を実現した。2。有機溶媒中での酵素の固定化担体と固定化法について詳細に検討した。特にポリビニルアルコ-ルへの包括固定化及び橋掛けキトサンビ-ズへ吸着固定化したプロテア-ゼによるアミノ酸のエステル化およびペプチド合成を行い、これらの固定化酵素が長期間にわたり安定で高い活性を保持することを明らかにした。3。親水性有機溶媒中でのプロテア-ゼによるペプチド合成反応における基質特異性の変化を検討した。その結果、αーキモトリプシンやスブチリシンのS_<1'>特異性が、水中におけるペプチドの合成及び加水分解反応に対する特異性と大きく異なることが見いだされた。これらの結果から、酵素周辺の環境が酵素構造及び酵素ー基質間の相互作用に与える影響について考察した。

我们进行了研究，目的是构建含有酶的微型多相反应系统，揭示了由其成分之间的相互作用引起的高度复杂功能，并证明了其作为新的生物验证因子的有用性，并实现了以下结果。 1。在水有机溶剂系统中通过蛋白酶水解氨基酸酯，并详细检查了酶活性和立体特异性对溶剂组合物的依赖性。结果，发现在高浓度（> 90％）的亲水性有机溶剂（例如乙腈）中，该酶保留高活性，并且立体特异性比在水中表现得更高。使用此结果，我们意识到了一种有效且易于分离的氨基酸光学分辨率方法。 2。详细研究了有机溶剂中酶的固定载体和固定方法。特别是，将氨基酸酯化并使用吸附的蛋白酶进行肽合成并固定在聚乙烯基醇中，并将氨基酸酯化酯化，并证明肽合成稳定并保留长时间。 3。研究了亲水性有机溶剂中蛋白酶肽合成反应中底物特异性的变化。结果，发现α-联戊酰和枯草素的S_ <1'>特异性与水中的肽合成和水解反应的特异性显着不同。这些结果研究了酶周围环境对酶结构的影响以及酶 - 基底酶之间的相互作用。