副腎皮質ミトコンドリアのチトクロムPー450関連酵素の局在に関する細胞化学的研究

细胞色素P-450相关酶在肾上腺皮质线粒体定位的细胞化学研究

• 批准号: 02217214
• 负责人: 高楠 彰
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Nara Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-02217214/
• 关键词: adrenodoxin; Pー450(SCC); 副腎皮質; ミトコンドリア; 免疫電子顕微鏡法; in situ hybridization法; Pー450(Fー1); 雌ラット肝臓

本研究は、チトクロムPー450関連酵素の細胞内局在および発現を、生体高分子の存在を直接、目で観察可能な細胞化学的方法(免疫電子顕微鏡法とin situ hybridization法)を用いて調べることを目的として行った。1、副腎皮質ミトコンドリア間でPー450関連酵素(adrenodoxin,adrenodoxin reductase,Pー450(SCC),Pー450(11β))の分布が、従来考えられていた様な不均一なものではなく均一なものであることを、現在大きく分けて3種存在する免疫電子顕微鏡法(preー,postー,and nonーembedding methods)の3種類全てを用いて示した。2、adrenodoxin,Pー450(SCC)のミトコンドリア内局在密度が、副腎皮質球状帯において、束状帯・網状帯より、2〜3分の1と低いことを、ウシ、ラットにおいて示した。3、副腎皮質ミトコンドリア内の丸く電子密度の高い顆粒中にもPー450関連酵素の局在が認められた。4、in situ hybridization法を用いてラット副腎皮質の実質細胞の細胞質にPー450(SCC)のmRNAの発現が認められた。5、肝臓における性特異的なPー450(雌ラット肝臓に特異的なPー450(Fー1))の細胞内局在部位と、生後発生過程を追った肝小葉内分布を免疫組織細胞化学的に調べた。Pー450(Fー1)は、凍結超薄切片を用いたprotein Aーgold法により、成熟雌ラット肝臓の滑面及び粗面小胞体、及び核の外膜にその局在が認められた。生後発生過程においてPー450(Fー1)は、新生雌ラットではほとんど存在しないが、生後3週令から中心静脈近傍のまばらな実質細胞に発現し始め、5週令〜8週令においては、中心静脈近傍の実質細胞に強い反応が認められた。又、11週令以降1年令までの雌ラットでは肝小葉内で比較的均一な局在分布が認められた。

は, this study チ ト ク ロ ム P ー 450 masato enzyme の cells inside bureau in お よ び 発 を now, living body polymer の を directly, mesh で 観 examine possible な cytochemical method (immune electron 顕 と micro mirror method in situ hybridization method) を with い て adjustable べ る こ と を purpose と し て line っ た. The でP <s:1> 450 associated enzyme in the paraprenal cortex between トコ ドリア ドリア (adrenodoxin,adrenodoxin) Reductase, P ー 450 (SCC), P 450 beta) (11) の ー distribution が, examine え 従 ら れ て い た others な heterogeneity な も の で は な く uniform な も の で あ る こ と を, now big き く points け て exist three す る immune electron 顕 micro mirror method (pre ー, post ー, the and Non-<s:1> embedding methods) <s:1> all three types てを are represented by て て for た. 2, adrenodoxin, P ー 450 (SCC) の ミ ト コ ン ド リ ア inside bureau in density が, adrenal cortex globular 帯 に お い て, bunchy 帯 mesh 帯 よ り, low 2 ~ 3 points の 1 と い こ と を, ウ シ, ラ ッ ト に お い て in し た. 3. In the paraprenal cortex, the く electron density <s:1> of the pellet is high in the <s:1> granule, and the に に <s:1> 450-related enzyme <e:1> is located in the が and められた. 4. in situ hybridization: を using the を てラット adrenal cortex, solid cells, cytoplasm, にP <s:1> 450(SCC) <s:1> mRNA <e:1>, が recognition められた. 5, a routine liver に お け る specific な P ー 450 (female ラ ッ ト liver perforatien に specific な P ー 450 ー 1) (F) の bureau after parts と, born in the cell 発 を after birth process っ た lobular distribution を immune cells in chemical に adjustable べ た. ー 1 P ー 450 (F) は, frozen ultrathin sectioning を with い た protein A ー gold method に よ り, mature female ラ ッ ト routine liver の sliding surface and び coarse surface small cell body, and nuclear の び outer membrane に そ の bureau at が め ら れ た. Postnatal 発 birth process に お い て P ー は ー 1 (F), 450 new female ラ ッ ト で は ほ と ん ど exist し な い が, three weeks after birth to make か ら central vein nearly alongside の ま ば ら な be stromal cells に 発 now beginning し め, 5 weeks to eight weeks to に お い て は, central vein near alongside の be stromal cells に い reverse 応 が recognize め ら れ た. In addition, from 11 weeks to 1 year, the で comparison in the <s:1> female ラットで な liver lobules shows a uniform な local distribution of が and められた.

项目成果

Kenーichiro Morohashi et al.: "Enzymatic Activities of Pー450(11β)s Expressed by Two cDNAs in COSー7 Cells." J.Biochem.107. 635-640 (1990)

Kenichiro Morohashi 等人：“COS-7 细胞中两种 cDNA 表达的 P-450(11β) 酶活性”。J.Biochem.107 (1990)。

K.Hagihara et al.: "Presence of Sex Difference of Cytochrome Pー450 in the Rat Preoptic Area and Hypothalamus with Reference to Coexistance with Oxytocin." Brain Research. 515. 69-78 (1990)

K. Hagihara 等人：“大鼠视前区和下丘脑中细胞色素 P-450 的性别差异与催产素共存有关。”515. 69-78 (1990)。

秦野 修: "種々の免疫電子顕微鏡法を用いたウシ副腎皮質アドレノドキシンの局在" J.Nara Med.Ass.41. 111-126 (1990)

Osamu Hadano：“使用各种免疫电子显微镜方法定位牛肾上腺皮质中的肾上腺素”J.Nara Med.Ass.41（1990）。